【讨论】【转贴】卵泡液的颗粒细胞培养

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IVF-ET手术中留取卵泡液→分离出颗粒细胞，培养贴壁后加入IGF-Ⅱ（分不同浓度）→留取上清液，测E2、P的值
现在，实验过程的问题是：①分离颗粒细胞时，红细胞仍不能有效除去
②颗粒细胞培养24小时后，在倒置显微镜下只能看见少量单个的颗粒细胞，换液后，再观察见细胞不在继续生长（所用的是M199培养基，50％Percoll和0.05g／L胶原酶Ⅰ型）
请问你：我的实验过程是哪步骤出问题，想跟你学习颗粒细胞培养的一些经验。谢谢！