【大讨论】日立生化机试剂用量

Q****N

一、原由：     在日立生化机（如7170）中，因为众所周知的原因（加试剂时试剂针都有剩余量，而且随加的量不同，剩余量也不同），许多双试剂 项目，当R1大于R2试剂的用量时，一段时间做下来后，试剂盒中会出现R1比R2多出很多情况，不知大家是如何解决的？还是干脆不解决，R1浪费算了！

二、现在我有一种想法，请大家讨论！

方法是：当R1大大于R2试剂的用量时，设置加R2试剂时，再加稀释液20ul（这是最低量）。

例如：GGT的试剂参数是 R1用量为200ul，R2用量为40ul,

如设置R2用量为40ul+20ul稀释液（用水），

我想，如果是这样设置，R2试剂就不会有剩余量，因为试剂与稀释液（即水）是同时加入的。

三、要解决问题：

解决稀释效应，毕竟整个系统多了20ul的水，其实就是检查其线性情况，这个大家可以做比对试验，用高浓度与低浓度样本进行 测试 ，或者考察高低浓度定标液吸光度的变化率（即高与低的吸光度之差，当然浓度点越多越好，多点才能真正反应是否为线性），如果稀释 与不称释相差无几的话，可认为 此项目行得通。

四、符合下列条件项目,R2多加20ul去离子水,然后做全面评价(日立7170),评价能通过,可实施:

1.双试剂,

2.R2为酶试剂的,且量比R1少一半以上.

3.反应试剂总量达到200以上,即让稀释率控制在十分之一以内(1.1倍以内).



五、我详细说明一下"加试剂时试剂针都有剩余量，而且随加的量不同，剩余量也不同":

日立生化机（如7170）其操作手册上有个关于"试剂针都有剩余量，而且随加的量不同，剩余量也不同"的表格如下(数据大该是这 样):

试剂针吸试剂总量　　31ul　64 ul　117 ul　171ul　224ul　277ul
应加试剂量　(吐出)　20ul　50 ul　100 ul　150ul　200ul　250ul
试剂针剩余量(浪费)　11ul　14 ul　17 ul　　21ul　 24ul　  27ul

举个例子,做AKP项目,反应试剂参数,R2为20ul,R1为200ul,   R2:R1=1:10
日立生化机实际做时R2要吸掉31ul,     R1吸掉224ul,     R2:R1=1:7
这个吸样比例与实际需要的比例(试剂盒标称的比例)严重失衡!
另外的11ul是白白的浪费掉的,对AKP项目来说损失三分之一的试剂.


六、欢迎大家来探讨。


edited by 小志2001 on 2005-10-24 at 05:48 PM

天**淡

我们用的也是日立,也有试剂浪费的情况,大多时候就丢弃了.
你说的方法从理论上还可以,实际操作起来可能还是有困难,因为试剂反应都是有比例的,稀释以后结果很难控制,这和质量控制又相违背了.
还有什么既节约又使结果稳定的办法呢???

乐*

感谢楼主提供好的话题参与讨论，希望以后经常能看到您的精彩发言！
我们用的是BECKMAN COULTER的生化仪，对日立的不熟悉。
欢迎大家积极参与讨论。