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前几年,我曾发表“目视细胞计数改进方案”,在临床工作中,胸腹水等标本因不同标本间WBC数量悬殊过大,标本性状多变,而容易困扰临床检验人员,在长年的工作实践中,我摸索出一套系统的方案,可以应对各种情况,简便高效的完成工作,特在此贡献出来,供广大检验同行借鉴,望大家提出宝贵意见。
一、清晰(微混)标本 【操作】标本0.5ml + 100%冰醋酸 1滴 混合 → → → 充池计数1大方格(16小格,1mm^2面积)WBC数,细胞数过少则计数4--9大方格(不管计数多少个方格,皆取平均值,即每大方格的平均数) 【计算】WBC数 / L = 1大方格白细胞数 × 10 ×10^6 / L 二、轻度混浊标本、血性标本 【操作】标本0.1ml + 15%冰醋酸0.2ml 混合(即稀释3倍) → → → 充池,见下图,以红线匡定的阴影区域为计数区域
【计算】WBC数 / L = 计数域白细胞总数× 10 ×10^6 / L 【解释】使用15%浓度冰醋酸,是我经过反复试验得到的,在仅3倍的稀释倍率下,为了破坏血性标本内的红细胞,不给计数遗留RBC残影,15%是必须的最低浓度 三、中、重度混浊标本 【操作】标本10微升 + 2 %冰醋酸0.29ml(血wbc计数稀释液) 混合 (即稀释30倍)→ → → 充池,计数区域同(二),即四个长条型红色阴影部分 【计算】WBC数 / L = 计数域白细胞总数 × 100 ×10^6 / L 【附注】如果WBC过多,堆得密密麻麻的,无法数清,则直接计数以下区域 下图是计数池中间的那部分结构图,以斜线勾出的阴影部分为计数区域(两个细长长条区域):
【计算】WBC数 / L = 计数域白细胞总数×1000 ×10^6 / L 或: 计数域白细胞总数×10^9 / L 四、极度混浊标本 此类标本的特征为: 外观呈灰白色混浊,摇动容器,感觉标本非常粘稠,李凡他试验强阳性 (++++)。直接涂片镜检WBC满视野。此标本WBC一般 > 150×109 /L,以常规的稀释倍数充池,WBC堆集过于紧密,难以完成计数;亦因过于粘稠的性状而造成难以用毛细管吸取,可使用微量加样器,用剪刀将加样器吸嘴剪去一截,使吸嘴尖端口径变大,之后再取样 【操作】标本50微升 + 2 % 冰醋酸14.5ml,反复用力搅拌或颠倒容器,使之充分混合(即稀释300倍) → → → 充池,计数区域同(二),即四个长条型红色阴影部分 【计算】WBC数 / L = 计数域白细胞总数 × 10^9 / L 【附注】因标本粘稠,加之吸嘴口径已变大,仅吸取10ul标本很难保证取量准确,至少要取到50ul
作者:景德镇第二医院 黄知进 |