免疫组化**法染色程序

d****a

[size=117%]免疫组化[size=117%]**[size=117%]法染色程序
[size=83%]1[size=83%]、冰冻切片或石蜡切片脱蜡下降酒精至水；[size=83%]0.01mol/L pH7.4PBS[size=83%]洗[size=83%]

[size=83%]
5min[size=83%]×[size=83%]3[size=83%]次；[size=83%]

[size=83%]2[size=83%]、阻断内源性[size=83%]peroxidase,0.3%H[size=54%]2[size=83%]O[size=54%]2_[size=83%]甲醇溶液[size=83%]([size=83%]或[size=83%]PBS)[size=83%]室温[size=83%]10~30min;
[size=83%]3[size=83%]、[size=83%]Ag[size=83%]修复[size=83%]:0.1%trypsin[size=83%]消化[size=83%],37[size=54%]O[size=83%]C1[size=83%]小时[size=83%];PBS[size=83%]洗[size=83%]5min[size=83%]×[size=83%]3[size=83%]次[size=83%];
[size=83%]4[size=83%]、[size=83%]1:50[size=83%]正常羊血清[size=83%],[size=83%]室温[size=83%],15min,[size=83%]不需漂洗[size=83%],[size=83%]直接加Ⅰ抗[size=83%];
[size=83%]5[size=83%]、滴加[size=83%]1[size=83%]比[size=83%]200[size=83%]倍稀释的[size=83%]Ⅰ抗[size=83%]([size=83%]不同[size=83%]Ab[size=83%]稀释度不同[size=83%]), [size=83%]湿盒内[size=83%], 37[size=54%]O[size=83%]C1h,[size=83%]或[size=83%]4[size=54%]O[size=83%]C

[size=83%]
[size=83%]冰箱内[size=83%]48~72h; PBS[size=83%]洗[size=83%]5min[size=83%]×[size=83%]3[size=83%]次[size=83%];
[size=83%]6[size=83%]、滴加[size=83%]生物素化Ⅱ抗[size=83%]1:100~200; [size=83%]湿盒内[size=83%], 37[size=54%]O[size=83%]C1h; PBS[size=83%]洗[size=83%]5min[size=83%]×[size=83%]3[size=83%]次[size=83%];
[size=83%]7[size=83%]、滴加[size=83%]**[size=83%]复合物[size=83%]1[size=83%]：[size=83%]100[size=83%]，湿盒内[size=83%], 37[size=54%]O[size=83%]C1h; PBS[size=83%]洗[size=83%]5min[size=83%]×[size=83%]3[size=83%]次[size=83%];
[size=83%]
[size=83%]（[size=83%]**[size=83%]复合物为卵白素、生物素[size=83%]1[size=83%]比[size=83%]1[size=83%]，[size=83%]PBS100[size=83%]倍稀释，用前[size=83%]30min[size=83%]配
[size=83%]
[size=83%]好，）
[size=83%]8[size=83%]、[size=83%]0.05%[size=83%]DAB[size=83%]-0.01 %[size=83%]H[size=54%]2[size=83%]O[size=54%]2[size=83%]液显色[size=83%](0.05mol/L pH7.6**[size=83%]配制[size=83%]),[size=83%]室温
[size=83%]
10~20min;[size=83%]显微镜下监控，至阳性产物出现而背景浅淡时，及时自来水
[size=83%]
[size=83%]洗终止反应；
[size=83%]9[size=83%]、复染[size=83%],[size=83%]脱水[size=83%],[size=83%]透明[size=83%],[size=83%]封片。[size=83%]

h****3

谢谢分享