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标本的存放温度及时间,血清、血浆及细胞分离的方法步骤也是分析前影响检验结果的重要因素。抽血后,血细胞因代谢需要,要消耗掉部分营养成分,故在临床需对这些成分进行测定时,需及时地离心以分离掉细胞成分。
将抗凝全血或凝固血液存放于4℃时,可抑制血细胞膜上的Na+,K+-ATPase,导致细胞内钾从细胞内漏出,从而使血浆或血清钾水平升高。将凝固血在4℃存放4小时就可见到此现象发生。由于钠斯细胞外的主要阳离子,Na+,K+-ATPase被抑制后,可使细胞外钠向细胞内扩散,将全血或凝固血在4℃存放24小时后可导致血清或血浆钠水平降低。所以,抽血后应尽量1小时内应离心分离血清或血浆。
凝固血在室温下存放超过8小时后,可使无机磷水平升高,这是因ALP使有机磷裂解为无机磷的缘故。23℃存放24小时血清无机磷升高10%,在30℃存放24小时血清无机磷升高120%。
血氨水平存在时间依赖性增加的趋势,特别是当患者血GGT活性较高时,因为GGT可催化谷氨酰胺产生氨。标本采集后,在离心分离血清或血浆前标本存放的温度及时间是影响检验结果的一个重要的分析前变量。对于儿茶酚胺的检测,抽血时加入稳定添加剂,随后于4℃存放,若1小时后才分离血浆,则可引起儿茶酚胺水平的升高。抽血后同样于4℃存放,2小时后离心分离血浆可导致血浆去甲肾上腺素水平升高13%。产生上述影响的原因是在4℃情况下,RBC裂解释放儿茶酚胺,同时,RBC对以上激素的摄取减少。此外,血浆蛋白在4℃发生冷沉淀可能也与血浆儿茶酚胺水平升高有关。相反,将标本在20℃存放,分离血浆的时间延后1小时后可致血浆儿茶酚胺水平降低,这主要是因为RBC、PLT对儿茶酚胺的摄取增加的缘故。同样,标本采集后存放于20℃,2小时后离心分离血浆,可使血浆去甲肾上腺素下降14%,肾上腺素水平下降20%。
标本的存放温度同样会影响PT、APTT的测定结果。标本在4℃存放过长,可使离心分离血浆VII因子激活。抗凝血在不分理血浆的情况下于4℃存放超过7小时后,可使PT缩短。
采血后加塞将标本在室温保存(25℃),PT可稳定48小时。然而,APTT最好在抽血后2-4内完成测定。标本采集后加塞于室温保存24小时后,可使APTT升高10-15%。
将血浆冻存于-20℃或-70℃,不会激活VII因子。-20℃保存血浆,PT及APTT结果可稳定10天;-70℃保存血浆,APTT及PT结果可稳定21天。
将血浆于4℃保存,II、V、VII、X因子可稳定6小时。血浆于-20℃或-70℃冻存后,除V因子外,上述因子可稳定14天。血浆分别在-20℃或-70℃冻存7天后,V因子将分别丧失20%及10%的活性。VIII因子是最不稳定的因子。在4℃条件下保存4小时后,其活性就降低10%;在-20℃存放3天后,活性丧失20%。
一般在1000g-1200g的条件下离心10-15分钟,以分离血清或血浆。降低离心力或缩短离心时间,可导致肝素抗凝血分离的血浆中有血小板残留,从而影响某些指标的检验结果,如钾等。在制备凝血试验所需乏血小板血浆时,应在2000g的条件下离心15分钟,稍稍降低离心力(1800g)就可导致血小板残留。次被血小板污染的血浆在冻存48小时后,凝血酶凝固时间缩短10%。 |
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