学员论文统计方法分析（原创）

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比较两种抗凝剂对血小板检测的影响

【摘要】 目的 探讨和分析两种不同抗凝剂对检测血小板及其参数的影响。方法 分别采用两种常用抗凝剂乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）、枸橼酸钠的抗凝全血, 随机采集5名同学静脉血在室温下,采用全自动血细胞分析仪进行血小板参数测定，然后分别采集5名同学末梢血手工计数血小板，比较两种抗凝剂检测结果。同时手工涂片瑞士染色观察血小板分布状况。结果 在测定的血小板中以EDTA-K2抗凝血的测定值为标准,测得其它两种抗凝剂对血小板均有不同程度的影响。结论 EDTA-K2 可导致血小板假性减少, 用柠檬酸钠抗凝能一定程度降低 EDTA-K2 对血小板计数的影响,必要时可采用手工计数加涂片镜检值得医学工作者注意。【关键词】　血小板;　EDTA-K2 ;　柠檬酸钠;　血小板聚集　

血小板在体内主要参与止血与血栓形成, 同时在动脉粥样硬化和炎性反应中起着重要的作用，因此血小板计数在血栓与出血性疾病的诊断与治疗中有重要的价值。[1]。 临床上普遍采用 EDTA-K2 作为血液分析的最佳抗凝剂。但近年来发现，EDTA-K2有时会引起血小板发生聚集，从而在血细胞分析仪检测时出现血小板假性减少[ 2]。假性血小板减少是由于血小板聚集导致血小板数量假性减少的现象。 其发生率低不容易被发现, 极易漏诊, 若这种现象不能被识别, 就可导致临床上的误诊[ 3]

材料与方法

1. 研究对象  随机选择5名同学

2. 仪器与试剂  全自动血细胞分析仪，EDTA-K2与枸橼酸钠真空负压抗凝管，玻片，一次性采血针，显微镜，瑞士染液，草酸铵稀释液

3. 方法  选5名同学于清晨空腹时分别用EDTA-K2  抗凝剂与枸橼酸钠抗凝剂抽取静脉血2ml。分别用血细胞分析仪进行血小板计数。 用两种抗凝血制备血涂片，瑞士染色后在显微镜下观察血小板的聚集情况 采5名同学末梢血用手工法计数，组内3名同学分别计数同一样本取平均值以减少误差，目的是比较两种抗凝剂计数的准确性

4. 统计学方法

采用 SPSS 13.0 统计软件，采用t检验，P<0.05 表示差异有统计学意义。

结果

5例EDTA-K2抗凝血标本血小板计数结果均减少，检测结果在165×109/L~267×109/L，直接用瑞士染液涂片染色镜检发现血小板有微量的成片聚集现象。而5例枸橼酸钠抗凝血标本血小板计数结果在219×109/L~300×109/L，直接涂片染色镜检发现血小板几乎无聚集现象，末梢血手工检测血小板结果也在正常范围，见下表。EDTA-K2 抗凝的血小板测定结果与枸橼酸钠抗凝的血小板结果比较，差异有统计学意义（P<0.05）；末梢血手工法检测血小板测定结果与枸橼酸钠抗凝的血小板测定结果差异无统计学意义（P>0.05）。

序号	EDTA-K2 抗凝血	瑞士染色 （EDTA-K2）	枸橼酸钠 抗凝血	瑞士染色 (枸橼酸钠)	末梢血 （手工计数）
1	267×109/L	微量聚集	300×109/L	散在无聚集	350×109/L
2	250×109/L	微量聚集	265×109/L	散在无聚集	234×109/L
3	197×109/L	微量聚集	219×109/L	散在无聚集	215×109/L
4	263×109/L	微量聚集	288×109/L	散在无聚集	265×109/L
5	165×109/L	微量聚集	231×109/L	散在无聚集	240×109/L

讨论

EDTA-K2 虽然是目前血液分析的最佳抗凝剂，但它引起血小板减少的病例也很多。据报道，EDTA 依赖性血小  板减少症临床发病率为 0.09%~0.21%[4]。其发生机制是由于血细胞自动分析仪是依据血小板体积大小及通过微孔时产生的脉冲数计数的结果 [5]。当血小板聚集时会使机器不能将其识别  而导致血小板计数的减少。而枸橼酸钠很好的消除了血小板的聚集情况，手工法也能准确的计数血小板数量，虽然精密度差，但对于 EDTA-K2 所致的血小板减少的复查也是一种有效方便的方法。因此，在临床工作中对于 EDTA-K2 抗凝的血液标本检测到血小板减低时，可以改用枸橼酸钠抗凝血进行复检，同时制备血涂片镜下观察血小板分布情况，以免误诊，尽量为临床医生提供准确有效的诊断信息。

参考文献

[1] 刘春生，柳发虎 . 不同抗凝剂对血小板检测结果的影响 [J]． 检验医学与临床，2011，8（8）:899-900.

[2] 邢忠海，刘东升 .EDTA 依赖型血小板减少的分析与对策 [J]．实用医学杂志，2011，27（3）:507-508.

[3] Yoneyama A ,Nakahara K .EDTA-dependent pseudothrombocy to penia differe ntiation from tr ue thrombo cy topenia[J] .Nippo n Rinsho , 2003 , 61(4):569-574 .

[4] 姜学慧，王英芳 . 比较两种抗凝剂对血小板测定结果的影响与分析 [J]．中国医学创新，2012，35（9）：109-110

[5] 于波海，范艳玲，沈伟霞，等. 乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少症病例分析[J]. 中国自然医学杂志，2007，9（1）：68-69.

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请诸位对我校学员撰写的论文中统计学方法的应用做出点评。

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这是应用的两样本均数比较的t检验方法。

EDTA-K2 抗凝的血小板测定结果与枸橼酸钠抗凝的血小板结果比较，差异有统计学意义（P<0.05），末梢血手工法检测血小板测定结果与枸橼酸钠抗凝的血小板测定结果差异无统计学意义（P>0.05）。EDTA-K2 抗凝的血小板检测方法引起血小板假性减少可能性极大。枸橼酸钠抗凝的血小板与手工法检测血小板测定结果可靠性较好。