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常用真菌培养基的组成及制法

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1# 楼主
发表于 2007-5-20 17:37 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式

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[沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂,沙堡弱培养基,SDA]

(一)        组成
葡萄糖                                40.0g
蛋白胨                                10.0g
琼脂                                  12.0~15.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)        目的
是常用的分离或保存菌种的培养基。

[沙氏液基,SDB]

(一)        组成
葡萄糖                                40.0g
蛋白胨                                10.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
上述混合后加入200mg氯霉素,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[加抗生素沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,SDA with antibiotic]

(一)        组成
葡萄糖                                40.0g
蛋白胨                                10.0g
琼脂                                  12.0~15.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
上述混合后加入200mg氯霉素。250mg***,121摄氏度10分钟灭菌后备用。

[改良沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂基,modified SDA]

(一)        组成
葡萄糖                                20.0g
蛋白胨                                10.0g
琼脂                                  12.0~15.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
上述混合后121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)        目的
保存菌种培养基。

[马铃薯葡萄糖琼脂,PDA]
(一)        组成
马铃薯                                200.0g
葡萄糖                                20.0g
琼脂                                  12.0~15.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
先将马铃薯洗净去皮切片,加水180ml,煮沸30分钟后过滤,再加葡萄糖、琼脂,将过滤液补足到1000ml,121摄氏度灭菌后备用。
(三)        用途
此培养基是培养真菌较好的培养基,同时也是鉴定真菌较好的培养基之一。鉴定皮肤菌一般不用此培养基。

[玉米吐温80琼脂,CMA with Tw80]
(一)        组成
玉米粉                                40.0g
琼脂                                  15.0g
蒸馏水                                1000ml
吐温80                                10ml
(二)        制法
先将玉米粉混于水中,65摄氏度水浴一小时,过滤,再补足水量,然后加入琼脂和吐温80,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)        用途
用于观察白念珠菌厚壁孢子及假菌丝;红色毛癣菌在此培养基产色素较好。

[米饭培养基 rice grain medium]

(一)         组成
大米                                300.0g
蒸馏水                              1000ml
(二)制法
将3g大米放入试管中,加入10ml蒸馏水,高压121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于区分奥杜盎小孢子菌和犬小孢子菌,前者在米饭培养基上生长差,犬小孢子菌生长良好,产生黄色素和典型大分生孢子。

[麦芽浸汁琼脂,MA]

(一)        组成
麦芽浸膏                                25.0g
琼脂                                    15.0g
蒸馏水                                 1000ml
(二)        制法
上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)用途
用于观察酵母产生子囊孢子。

[脑心浸膏琼脂。BHI]
(一)        组成
脑心浸膏                                35.0g
琼脂                                    15.0g
蒸馏水                                 1000ml
(二)        制法
上述混合后,121摄氏度10分钟灭菌后备用。
(三)        用途
双相真菌可在该培养基上呈酵母相。

[皮肤癣菌鉴定培养基,DTM]

(一)        组成
葡萄糖                                10.0g
蛋白胨                                10.0g
琼脂                                  15.0g
酚红                                  0.2g
0.8N盐酸                              6.0g
***                              0.5g
庆大霉素                              0.1g
氯霉素                                0.125g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
将葡萄糖、蛋白胨和琼脂混于1000ml水中,加入40ml酚红并震荡(酚红0.5g溶于15ml 0.1NaOH中加水至100ml),然后加入6ml0.8N HCL并震荡;***0.5g溶于2ml丙酮中,倒入培养基中;庆大霉素及氯霉素溶于2ml水中,然后加入培养基。121摄氏度15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
分离和鉴定皮肤癣菌。

[尿素培养基,Christensen urea agar]

(一)        组成
A溶液:
葡萄糖                                1.0g
蛋白胨                                1.0g
NaCl                                 5.0g
KH2PO4                               2.0g
尿素                                  20.0g
酚红                                  0.012g
蒸馏水                                100ml
B溶液:
琼脂                                15.0g
蒸馏水                               900ml
(二)        制法
将A溶液混匀,过滤灭菌;加热溶解B液,然后121摄氏度15分钟灭菌后。将B液冷却至50摄氏度后与A液混合后分装。
(三)        用途
用于鉴定须癣毛癣菌和隐球菌,可使橘红色培养基变成紫红色。

[察氏培养基,CZA]

(一)        组成
硝酸钠(NaNO3)                                3.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4)                           1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)                           0.5g
氯化钾(KCl)                                   0.5g
硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)                          0.01g
葡萄糖                                           30.0g
琼脂                                             15.0g
蒸馏水                                           1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,加热直到完全溶解,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
分离和鉴定青霉、曲霉。

[咖啡酸琼脂,CAA]

(一)        组成
硫酸铵(NH4)2SO4                                5.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4)                             0.8g
硫酸镁(MgSO4.3H2O)                             0.7g
咖啡酸                                             0.18g
枸橼酸铁                                           0.002g
酵母浸膏                                           2.0g
葡萄糖                                             5.0g
琼脂                                               15.0g
蒸馏水                                             1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,枸橼酸铁先配成原液,然后加入。高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
鉴定新生隐球菌和其他隐球菌。前者成为黑色或深棕色。

[高盐培养基,Takashio medium]

(一)        组成
磷酸二氢钾(KH2PO4)                                1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)                                1.0g
葡萄糖                                                2.0g
蛋白胨                                                1.0g
琼脂                                                  15.0g
蒸馏水                                                1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
用于观察皮肤癣菌的有性时期。

[子囊孢子培养基,ascospore agar]

(一)        组成
醋酸钾                                10.0g
酵母浸膏                              2.5g
葡萄糖                                1.0g
琼脂                                  15.0g
蒸馏水                                1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
鉴定产子囊孢子的真菌。

[酵母浸膏磷酸盐培养基,yeast extract phosphate agar]

(一)        组成
A液:
酵母浸膏                                1.0g
琼脂                                    15.0g
蒸馏水                                  1000ml
B液:
磷酸二氢钾(KH2PO4)                                6.0g
磷酸二氢钠(NaH2PO4)                               4.0g
蒸馏水                                                30ml
C液:
氢氧化铵(NH4OH)                                    1.0g
(二)        制法
先将A液混匀,将B液PH调节至6,然后取2ml加入A液,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用,每次用时加入少许氢氧化铵。
(三)        用途
鉴定和培养组织胞浆菌,和皮炎芽生菌。

[石蕊牛乳培养基,litmus milk agar]

(一)        组成
脱脂奶粉                                100.0g
石蕊                                    750.0g
酵母浸膏                                5.0g
葡萄糖                                  3.0g
蒸馏水                                  1000ml
(二)        制法
混合上述物质,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
用于鉴定放线菌。

[Bennett琼脂]

(一)        组成
酵母浸膏                                1.0g
牛肉浸膏                                1.0g
酪蛋白氨基酸                            2.0g
葡萄糖                                  10.0g
琼脂                                    15.0g
蒸馏水                                  1000ml
(二)        用途
用于需氧放线菌产生孢子。

[诺卡菌鉴定培养基,identification agar for Nocardia]

(一)        组成
1、液化明胶  脑心浸汁                                25.0g
             明胶                                    120.0g
             蒸馏水                                  1000ml
             (PH 7.4~7.6)
2、水解淀粉  淀粉                                     2.0g
             葡萄糖                                   6.0g
             蛋白胨                                   10.0g
             琼脂                                     15.0g
             蒸馏水                                   1000ml
3、水解酪蛋白
A液:脱脂奶粉                                10.0g
      蒸馏水                                  90ml
B液:琼脂                                    3.0g
     蒸馏水                                   17ml
分别高压,然后混匀。
4、酪氨酸(黄嘌呤)琼脂  营养琼脂                                23.0g
                         酪氨酸(黄嘌呤)                    5.0(4.0)g
                         水                                     1000ml
5、营养琼脂  牛肉浸膏                                3.0g
             蛋白胨                                  5.0g
             琼脂                                    15.0g
             蒸馏水                                 1000ml
(二)        制法
高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用
(三)        用途
用于鉴定诺卡菌和链丝菌。

[合成毛霉琼脂,synthetic agar for Mucor]

(一)        组成
磷酸二氢钾(KH2PO4)                                0.5g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)                                0.25g
葡萄糖                                                40.0g
天门冬酰胺                                            2.0g
硫胺                                                  0.5g
琼脂                                                  15.0g
蒸馏水                                                1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
鉴定结合菌。

[无碳源培养基,yeast nitrogen base]
(一)        组成
硫酸铵(NH4)2SO4                                5.0g
磷酸二氢钾(KH2PO4)                             1.0g
硫酸镁(MgSO4.7H2O)                             0.5g
酵母浸膏                                           0.2g
琼脂                                               15.0g
蒸馏水                                             1000ml
(二)        制法
将以上成分依次混入1000ml水中,高压121摄氏度,15分钟灭菌后备用。
(三)        用途
糖同化试验基础培养基。先转种菌种在培养基上,3天后重复转种一次。将菌悬液与上述培养基混合后制成平皿。将含20%的糖滤片置于平皿中,观察同化现象。先用蔡氏滤液过滤糖溶液。

[Leeming和Notman培养基]

(一)        组成
蛋白胨                                10.0g
葡萄糖                                5.0g
酵母浸膏                               1.0g
牛胆盐                                4.0g
甘油                                   1.0g
单硬脂酸甘油酯                         0.5g
吐温60                                0.5ml
全脂牛奶                               10.0g
橄榄油                                20.0ml
琼脂                                  12.0g
***                              0.5g
氯霉素                                0.05g
蒸馏水                                1000ml
(二)        用途
用于培养马拉色菌。

[七叶苷琼脂,esculin agar]

(一)        组成
Leeming和Notman培养基加入0.2%枸橼酸铁和0.1%七叶苷。
(二)        用途
用于鉴定马拉色菌。

[橄榄油培养基,olive oil medium for Malassizia sp.]

(一)        组成
蛋白胨                                10.0g
葡萄糖                                40.0g
酵母浸膏                              0.1g
单硬脂酸甘油酯                        2.5g
吐温80                                2.0ml
橄榄油                                40.0ml
琼脂                                   18.0g
***                              0.5g
氯霉素                                0.05g
蒸馏水                                1000ml
(二)        用途
用于培养马拉色菌。其中如果没有橄榄油,也可以用菜籽油代替。

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