请问乙肝HBV-DNA与乙肝前S1抗原检测有什么不同？

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请问乙肝HBV-DNA与乙肝前S1抗原检测有什么不同？对于乙肝携带者有没有必要两者都检查？会不会重复检查？

小****1

乙型肝炎血清标志物、前S抗原与病毒载量的关系及意义


  
  [摘要]
    目的 　研究乙肝检测的血清标志物、病毒前S1抗原和HBV-DNA检测的关系和运用价值。
    方法　 对1163例乙肝患者血清分别进行乙肝病毒标志物（HBV M）、前S1抗原和HVC-DNA水平的测定，并对结果进行比较。
    结果　 HBV-DNA总检出率为62.9%，显著高于前S1抗原总检出率（53.0%），显著高于HBeAg（35.3%），显著高于平行。
    结论　 乙肝病毒标志物（HBV M）、前S1抗原、PCR荧光定量技术在判断乙肝的**和传染性中各有优势，要综合多方面的结果，方可确切的判断和治疗。
  [关键词]   慢性乙型肝炎；HBV-DNA；HBeAg；Pre-S

　　　　应用ELISA法测定HBV感染者血清中乙肝病毒标志物（HBV M），其结果对评估HBV感染者病毒**、转归、预后等情况有一定局限性。笔者应用HBV-DNA、前S1抗原两种指标，对1163例门诊病人进行HBV M、乙肝病毒前S1抗原、HBV-DNA的检测，并对三种指标检测结果相互关系进行了探讨。
材料和方法
1、标本来源  1163例乙肝病毒感染血清来自本院门诊和传染科，各项检查在当天完成。100例健康人血清选自我院健康体检人群（乙肝血清标志物为全阴HBsAB(+))
2、仪器  美国EIA-BIO公司产3550型酶标仪，美国ABI7000全自动荧光定量分析仪。
3、方法  乙肝前S1抗原检测试剂由上海阿尔法生物技术有限公司提供，采用双抗夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA），以固相化的S单抗捕获标本中的乙肝S抗原、辣根过氧化物酶标记的抗-前S1单抗为二抗来检测前S1抗原，用Bio-Rad公司3550型酶标450nm波长比色。结果判断：临界值（cutoff）=2.1×阴性对照平均OD值，分别计算测试标本的OD值/cut-off ，大于或等于1为阳性，小于1为阴性。
    乙肝血清学标志物HBsAg、抗s、HBeAg、抗-HBe和抗HBc检测均采用ELISA法，试剂由上海科华实业生物有限公司提供。
    HBV DNA检测采用荧光定量PCR法，试剂由中山大学达安基股分有限公司模板提取离心分离血清，取40μl血清于1.5ml离心管中，加40μlDNA提取液，沸水浴煮10分钟 ，11000r/min离心5分钟。反应  取上清液2P1加入反应管中，混匀，瞬时离心。循环参数为93℃ 45秒，55℃ 60秒，10次循环后，然后再进行93℃ 30秒，55℃ 45秒，30次循环后。最后30个循环测定荧光量。同时用1×102，1×103，1×104 DNA拷贝数个/μl的定量液时行护增检测，以扩增前后的荧光差值为纵坐标，拷贝数为横坐标，在由ABI 7000自动作标准曲线，并计算出标本中的DNA拷贝。同时设阴性对照。
4、统计学方法  率的显著性检验用X2检验，血清前S1抗原和HBV NDA两者相关性分析用SPSS10.0统计软件处理。
结果
1、1163例血清标志物、前S1抗原和HBV-DNA检测结果如一：
    由表中数据可见I组：HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)，血清多数HBV-DNA＞106拷贝/ml，Ⅱ组：HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)血清阳性多数HBV-DNA＜105，Ⅲ组：HBsAg(+)、抗c阳性多数为阴性，阳性村本HBV-DNA＜105拷贝/ml，Ⅳ组：抗HBs(+)、HBeAb(+)、抗HB标本基本为阴性。Ⅴ组为对照组。
表1  ELISA和PCR法检测HBV血清标志物的结果

组别 模式组例数 HBV DNA 阳性定值范围

＜103 ＞103-4 ＞104-5 ＞105-6 ＞106-7 ＞107-8 ＞108-9 ＞109 检出率%
Ⅰ 411 7 17 31 59 71 76 125 25 98.3
Ⅱ 698 389 91 79 52 40 31 16 0 44.3
Ⅲ 43 25 5 4 3 4 1 1 0 40.0
Ⅳ 11 10 1 0 0 0 0 0 0 16.7
Ⅴ 100 100 0 0 0 0 0 0 0 0

2、1163例血清HBeAg、前S1抗原和HBV-DNA检出率比较和相关性分析。
    1163例标本中HBV-DNA总检出率为62.9%（732/1163），前S1抗原总检出率为53.0%（616/1163），HBeAg总检出率为35.3%（411/1163）。HBeAg阳性组HBV-DNA及前S1抗原阳性率显著高于HBeAg阴性组（P＜0.01）。
    HBV-DNA在HBeAg阳性组的检出率为98.3%，明显高于HBV-DNA在HBeAg阴性组的检出率44.1%，两者有显著性差异（X2=18.4，P＜0.01），前Pre-S1在HBV-DNA阳性组的检出率75.3%，明显高于HBV-DNA在阴性组的检出率15.1%，两者有显著性差异（X2=19.85，P＜0.01），前S1抗原同HBV-DNA符合率为78.8%（917/1163）。两者总体检出率有关联（X2=19.85，P＜0.01），Pre-S1在HBeAg阳性组的检出率为91.2%，明显高于HBeAg阴性组的检出率为32.0%，两者有显著性差异（X2=19.32，P＜0.01），HBeAg同Pre-S1抗原符合率为76.2%（886/1163）。两者总体检出率有关联（X2=19.32，P＜0.01）。
   3、HBeAg、前S1抗原和HBV-DNA同时阳性标本两者含量相关性分析。把HBeAg/前S1抗原的标本OD值/cutoff比值拟定为HBeAg/前S1抗原的相对滴度，1163例BeAg相对滴度与HBV-DNA含量不存在明显相关性（r=0.112，P＞0.05）、前S1抗原相对滴度与HBV-DNA含量也不存在明显相关性（r=0.149，P＞0.05）。
讨论
    我国是HBV感染的高发区，人群中HBeAg阳性率高达10%以上，在HBV M中，HBsAg、HBeAg是HBV在进行**、包装过程中产生的蛋白成分，HBsAg存在并不一定表示有传染性，而HBeAg是HBV核心内部成分，可作为体内HBV处于**状态的标志。从血清标本物ELISA检测结果组合来看，第I组HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为98.3%和91.2%，说明这组患者存在病毒的处于高**状态。从HBV-DNA定量结果看，DNA含量分布成正偏态，其阳性标本多数大于106拷贝/ml也证明了这一点。第Ⅱ组中HBV-DNA与Pre-S1蛋白的检出率分别为44.3%和33.7%，同时HBV-DNA定量结果也较低，其阳性标本多数小于105拷贝/ml证实了部分HBeAg阴性而抗-HBeAg阳性。第Ⅲ组和第Ⅳ组HBV-DNA阳性率更低，且阳性标本都小于105拷贝/ml，表明病毒**水平列低。实验证明这些HBeAg阳性模式组的乙肝患者HBV**最活跃，是感染期最危险的传染源，为此应该加以积极医治。
    乙型肝炎病毒前S1抗原存在于Dane颗粒及管状颗粒的表面，前S1抗原与HBV病毒的**相关。前S1蛋白主要出现于HBV病毒期，含有肝细胞受体，在HBV感染细胞和机体免疫应答方面起重要作用。在病毒感染机体的整个周期中，前S1蛋白的独特功能，使其能够较充分的反应机体的体液免疫状况，反应病程的转归过程 急性肝炎前S1抗原阴转是病毒清除的最早迹象，反之疾病将发展至慢性肝炎，这是单一测定HBV-DNA所不能做到的。本实验证明，HBV的传染性与乙肝病毒前S1抗原阳性率具有一致性，因此前S1阳性有助于乙肝病毒肝炎的诊断，并可作为HBV具有传染性的指标之一。有很好的***参考价值。
    HBV-DNA作为HBV的基因组成和**模板，被认为是病毒**和具有传染性的直接证据。将乙型肝炎病毒前S1抗原和HBV-DNA平行检测结果进行比较分析中可以看出。以HBV-DNA定量＞103拷贝/ml为诊断标准，HBV-NDA阳性患者HBeAg、Pre-S1蛋白的检出率分别为55.1%（404/31）、75.2%（551/732）、78.8%（917/1163）。HBeAg阴性的患者有44.1%可检出HBV-DNA，32.0%可检出乙型肝炎病毒前S1抗原。而HBV-DNA同乙型肝炎病毒前S1抗原符合较好，但也有19.7%的HBV-DNA阴性患者可检出前S1抗原，同时24.7%的乙型肝炎病毒前S1抗原阴性患者可检出HBV-DNA。说明患者血中HBeAg、HBV-DNA、乙型肝炎病毒前S1抗原在检出率上有一定关联，但三者变化并不一致。
   当乙肝病毒为逃避宿主的免疫反应基因可发生变异，其所携带的HBV变异毒株大多数表现为在病毒基因组前C区末端1896位发生G-A点突变，产生一个新的终止密码子（TAG），阻断了HBeAg的形成，导致在临床上可出HBeAg检测为阴性。HBV-DNA定量检测是乙肝病毒存在和**的直接标志，HBV-DNA的定量检测是乙肝病毒为乙肝病毒在体内的动态研究提供了依据。当HBV-DNA定量检测时反应体系中存在抑制物，HBV-DNA发生变异或只能对体内存在HBV-DNA水平较低，HBV-DNA不能检出，病人仍带有乙肝病毒且存在传染性的可能不能监测。
    HBV M，HBV-DNA和前S1抗原之间的之间的检测结果有相互关联，但所表达的临床意义并不完全不致，对不同类型HBV感染患前S1抗原，HBV M和HBV-DNA的联合动态检测有助临床诊断，疗效观察及预后判断。

小****1

一、 检验两对半为何还要查Pre-S1，重复检查是浪费吗？
　　答：目前，乙型肝炎病毒血清学检测项目主要是HBV-M（即乙肝五项，包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb）。目的是诊断患者的感染状况，病毒**情况，病程预后和药物疗效的观察等。前S1抗原的检测能够从以下几个方面弥补和加强乙肝五项检测的不足。
　　1．前S1抗原出现在急性乙型肝炎感染的早期，在转氨酶升高前即可查出，提示可作为早期诊断乙肝病毒感染的指标。
　　2．急性乙型肝炎患者前S1抗原阴转越早，预后越好，是病毒清除的最早迹象。反之，前S1抗原持续阳性，将发展至慢性肝炎。（此指标比HBeAg阴转、HBsAb阳转指标提示要早）。
　　3．HBeAb（+）慢性乙型肝炎约占慢性乙肝的30%-50%，检测前S1抗原，提示病毒在机体内继续**，此类患者更容易演变为肝硬化或肝癌。加查前S1抗原，弥补了因HBeAg缺失造成的诊断和治疗困难。
　　4．在HBV无症状携带者中，有一定比例的HBeAb（+）者，加查前S1抗原（+）提示病毒在体内还较活跃。病毒并没有清除，肝脏还有潜在的病理损伤的可能。
　　5．抗病毒治疗乙型肝炎，加查前S1抗原可作为治疗前的患者筛查和治疗后的疗效判断，尤其对HBeAb（+）的慢性肝炎患者抗病毒治疗的排查也起到重要作用。
　　所以检验两对半，加查前S1抗原可在急性肝炎，慢性肝炎，HBV无症状携带者和抗病毒治疗乙型肝炎诊疗过程中起到十分重要的作用。这样的加查，不能说是浪费。
　　二、HbeAb（+）的HBV感染者中，为何要检查前S1抗原？
　　在我国近3千万人的慢性乙型肝炎患者中，其中约有30%左右的患者，抗HBe阳转后，病毒在体内继续**，病情较重，其中部分可以演变为肝硬化或肝癌，自然好转率非常低。同样，HBeAb（+）的HBV无症状携带者也占有一定的比例。这一部分HBeAb（+）的慢性肝炎和HBV无症状携带者，往往是因为病毒基因变异所致，其所携带的HBV变异毒株大多数表现为在病毒基因组前C区末端1896位发生G-A点突变，产生一个新的终止密码子（TAG），阻断了HBeAg的形成，导致在临床上出现HBeAg缺陷和HBV血清型。因HBeAg的缺失，造成诊断和治疗的困难。此时，检测前S1抗原既能较为准确的检测病毒在机体内**状况，又能诊断疾病的转归和了解是否携带HBV变异毒株。充分显示了前S1抗原的临床价值。所以抗HBeAb（+）的HBV感染者中，加查前S1抗原是非常必要的。

l****g

很多谢斑竹的回复!同时请问一般你们开展乙肝前S1抗原是定性检查或定量检查?

小****1

乙肝前S1抗原是定性检查