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美国学者报告了两种用于诊断猴痘感染的酶联免疫分析(ELISA)和免疫印迹技术,这两种技术可用于正痘科病毒的血清学调查和猴痘暴发的回顾性分析。该研究发表在《新发感染性疾病》[Emerg Infect Dis 2008,14(4):592]杂志上。
猴痘阳性组为2003年威斯康星州暴发的猴痘病例及亚特兰大疾病预防与控制中心确诊的猴痘病例,其中无疫苗免疫者13例,有疫苗免疫者8例(其中3例为隐性感染,为实验室确诊的病例)。阴性对照组为近期使用天花疫苗者10人,免疫2~4个月后再免疫组10人,长期免疫(20~40年)组10人,未免疫者12人。
ELISA板用猴痘病毒感染的细胞裂解物包被,血浆标本使用1∶30稀释的双氧水灭活的猴痘或者疫苗全细胞裂解物预吸收。差异免疫印迹为转印有分子量标记、猴痘和疫苗的膜用缓冲液封闭,血浆样本膜在1∶20稀释的未感染的细胞裂解物或双氧水灭活的疫苗裂解物中封闭。
以2.5倍差异作为吸收后ELISA判读点,特异性和敏感性均为100%。如果判读点升高为3.0,则敏感性为93%,特异性为100%。如果判读点降低为2.0,则敏感性为100%,特异性为90%。使用2.5倍升高作为判读点,所有患者标本中为未免疫组100%阳性,免疫组63%,其中3例阴性标本所对应的患者无猴痘临床症状。吸收后ELISA方法总敏感性为86%,特异性为100%。
对于差异免疫印迹反应,39 kDa条带作为初次感染者的诊断敏感性为100%,再次感染猴痘者的诊断敏感性为75%,特异性为70%~80%。
吸收后ELISA对于未免疫的猴痘患者和免疫后但有明显临床症状的猴痘患者,诊断敏感性和特异性均为100%,差异免疫印迹敏感性和特异性大于70%。需注意被动免疫对此两种方法仍有干扰。 |
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