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[仪器试剂] 【求助】时间分辨和化学发光(感谢ljm216战友)

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1# 楼主
发表于 2006-1-15 22:00 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式

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我科想购买机器,主要是用于免疫方面的检验,请问这二种应该选哪一种

[ 本帖最后由 乐园 于 2006-3-19 20:53 编辑 ]
2# 沙发
发表于 2006-1-16 18:04 | 只看该作者
各有各的好处啊,要看你的标准是什么的啊,这二台机子我科里都进啊,
3# 板凳
发表于 2006-1-22 16:57 | 只看该作者
想淘汰现用的放射免疫,主要用于免疫方面的检查。
4
发表于 2006-2-12 22:46 | 只看该作者
我建议你买化学发光,时间分辨性能不好,结果不稳定,谁买了谁后悔的!!!!!!!:D
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发表于 2006-3-18 14:58 | 只看该作者
时间分辨的测量范围比化学发光宽,灵敏度比化学发光高,准确性也要比化学发光好!!!!我就是做这两方面研究的!
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发表于 2006-3-18 22:20 | 只看该作者
时间分辨荧光分析法(Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一测微量分析方法,是目前最灵敏的微量分析技术,其灵敏度高达10-19,较放射免疫分析(RIA)高出3个数量级。
  时间分辨荧光分析法(TRFIA)实际上是在荧光分析(FIA)的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析。荧光分析的利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响,同时,荧光分析与普通分光不同,光电接受器与激发光不在同一直线上,激发光不能直接到达光电接受器,从而大幅度的提高了光学分析的灵敏度。但是,当进行超微量分析的时候,激发光的杂散光的影响就显得严重了。因此,解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈。
  解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在。但普通的荧光标志物荧光寿命非常短,激发光消失,荧光也消失。不过有非常少的稀土金属(Eu、Tb、Sm、Dy)的荧光寿命较长,可达1-2ms,能够满足测量要求,因此而产生了时间分辨荧光分析法,即使用长效荧光标记物,在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法。
  平时常用的稀土金属主要是Eu(铕)和Tb(铽),Eu荧光寿命1ms,在水中不稳定,但加入增强剂后可以克服;Tb荧光寿命1.6ms,水中稳定,但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解,因此从测量方法学上看Tb很好,但不适合用于生物分析,故Eu最为常用。
  由于常用Eu作为荧光标记,因此增强剂就成了试剂中的重要组成。增强剂原理:利用含络合剂、表面活性剂的溶液的亲水和亲脂性同时存在,使Eu在水中处于稳定状态。现在有些试剂,在络合Eu在抗体上时已考虑了增强问题,而使用了具有增强作用的新络合剂,因而有的试剂没有单独的增强剂。
  随着检验医学的发展,对微量、超微量的测定会越来越多,同时RIA的污染问题会越来越被重视,因此,时间分辨荧光分析法(TRFIA)具有越来越大的应用空间。

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发表于 2006-3-18 22:20 | 只看该作者
 化学发光免疫测定(Chemiluminesent Immunoassay,CLIA)是免疫测定技术继酶免技术(EIA)、放免技术(RIA)、荧光免疫技术(FIA)和时间分辨荧光免疫技术(TRFIA)之后发展的一项新兴测定技术。要谈化学发光免疫测定技术就必须先谈化学发光。

  化学发光技术是近二、三十年来发展起来的一种测定方式,其利用化学反应释放的自由能激发中间体(常用碱性磷酸酶-金刚烷胺),使其从激发态回到基态,当中间体从激发态回到基态时会释放等能级的光子,对光子进行测定而进行定量分析。化学发光具有荧光的特异性,同时不需要激发光,就避免了荧光分析中激发光杂散光的影响有很高的灵敏度,并且不象放射分析那样存在强烈的环境污染和健康危害,是一种非常优秀的定量分析方法。

  虽然化学发光具备很高的特异性和很小的干扰,但化学分析本身的不特异性,制约了整个方法的使用。因此,如同RIA、FIA等一样利用免疫反应的特异性和化学发光本身的信号特异性形成了目前所说的化学发光免疫测定(CLIA)技术。

  CLIA是一种高度敏感的微量测定技术,凡具有抗原性的物质(包括半抗原)都可以用CLIA测定。其起步于80年代初,快速发展于90年代,在国外CLIA的应用处于蓬勃发展的阶段,其具备以下特点

  ①高度敏感,极限达10-17-10-19M/L,远高于RIA、EIA,与TRFIA相当但比TRFIA便宜。

  ②特异性强,重复性好C.V.<5%。

  ③测定范围宽,可达7个数量级。

  ④试剂稳定性好,无污染有效期6-12月。

  ⑤操作简单,易于自动化。

  在对环保很重视的国家,CLIA成了取代RIA的首选方法。
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发表于 2006-3-18 22:21 | 只看该作者
你还是自己看着办吧,这两种的适用范围我发给你了
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