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Cole and colleagues developed a method for maintaining Vm at any desired voltage level (FBA, Feedback Amplifier)
Required monitoring voltage changes, feeding it through an amplifier to drive current into or out of the cell to dynamically maintain the voltage while recording the current required to do so——摘自山大医学院生理课件,见附件2,附件3
电压钳(voltage clamp)又叫电压钳制或电压固定。该技术由Cole和Marment设计,后经Hodgkin和Huxley改进并成功地应用于神经纤维动作电位的研究。其设计原理是根据离子作跨膜移动时形成了跨膜离子电流(I),而通透性即离子通过膜的难易程度,其膜电阻(R)的倒数,也就是膜电导(G)。因此,膜对某种离子通透性增大时,实际上时膜电阻变小,即膜对该离子的电导加大。根据欧姆定律V=IR,即I=V/R=VG,所以,只要固定膜两侧电位差(V)时,测出的跨膜电流(I)的变化,就可作为膜电导变化的度量,即可了解膜通透性的改变情况。
电压钳装置(附件1)有两个微电极插入细胞,一个是测量膜电位的微电极Em,它通过高阻抗前级放大器(XI)检测膜电位(Em),并将信号输入反馈放大器(FBA);另一电极I’ 与FBA输出端相连,用作向细胞内注入电流,FBA的两个输入端中一个接受电位Em的输入,另一个接受指令电位(C),当两者电位相等时输出电流为零,当两者出现差异时,FBA经电极I’ 输出向细胞内注入电流,该电流在膜两侧产生趋向于指令电位C的电位变化,如此构成一个使膜电位始终等于指令电位C的反馈电路,此时记录的Im就可反应膜电导G的变化。其实Im就是经电极I’ 注入的电流,后者在电压钳制期间精确地对抗通道电流而使膜电流保持恒定。——摘自网上
edited by 臻臻 on 2005-10-6 at 10:39 PM |
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