全科医疗诊室：露而不藏（21）结核T细胞斑点试验（T-SPOT）

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结核T细胞斑点试验（T-SPOT），又叫作结核感染干扰素释放试验（Interferon Gamma Release Assays，IGRAs）。该检查的原理：结核分枝杆菌感染后，T淋巴细胞会形成免疫“记忆”；通常在体外分离到T淋巴细胞后，培养增殖T细胞的同时用相应特异抗原进行**，激活该细胞的记忆；有记忆的细胞会分泌干扰素；通过检测干扰素的量，来判断该细胞是否有结核感染形成的记忆，进一步反应是否有结核感染。该检测需采集患者新鲜静脉血标本，此法得到美国CDC的推荐和国内专家的认同，可以辅助早期诊断和鉴别诊断。
临床上哪些结核需要做T-SPOT？临床上如何正确评判其阴性结果与阳性结果？

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T-SPOT是结核菌感染T细胞斑点试验，用于检测结核菌感染后特异性T细胞分泌的γ干扰素（INF-γ），并根据此结果判断是否感染核。
2001年，Lalvani首先将ELISPOT技术用于结核病的诊断，此后相关报道日益增多。2004年在欧洲，2005年在加拿大被批准使用，美国FDA于2008年审批用于临床诊断。它是以ELISPOT技术检测结核菌的一种新方法，相当于检测HBV的斑点杂交技术，可以检测出1/100000~1/500000外周血单个核细胞（PBMC）中经抗原**产生的细胞因子，用ELISPOT分析系统进行斑点计数，从而计算出抗原特异性细胞出现的频率。
临床实践证明，T-SPOT具有快速、敏感和良好的特异性。有症状的结核病通常可以通过痰涂片及培养，影像学诊断而确诊，但对肺外结核的诊断比较困难（特别是针对儿童），而且对于潜伏性结核（即没有临床症状，胸片或CT扫描正常，传统PPD试验阴性，痰检等均为阴性者）用传统的方法无法确诊，使得部分患者成为“隐性传染源”而危害公众健康。由于血清学检测方面，试剂的灵敏度低，不能区分既往感染和现症感染患者，2011年7月20日，WHO发表正式声明，要求禁止将血清学检测方法（抗原、抗体、蛋白芯片等）用于肺结核和肺外结核的诊断。T-SPOT技术利用效应T淋巴细胞再次受到结核菌抗原**时会分泌特异性细胞因子的原理，检测结核菌感染比其他方式更加灵敏，并且可用于结核菌潜伏感染的诊断，因此被列入美国、英国等欧美20多个国家结核病诊疗指南，而且美国CDC推荐将此项检测列为BCG（卡介苗）接种人群结核菌感染的首选检测方法。
T-SPOT检查的优点：
1.特异性95%左右，不受卡介苗接种与环境分枝杆菌的影响 。
2.灵敏度95%左右，几乎不受个体免疫功能低下的影响。
3.快速检测，24小时内可报告结果 。
4.斑点数的意义：斑点越多越倾向于活动性结核、现症感染，并可作为疗效监测指标。
国内文献报告，T-SPOT检测结核的灵敏度为94.7%，在肺疾病组和肺外疾病组分别为95.6%和93.3%；特异性为84.1%，在肺疾病组和肺外疾病组分别为69.2%和88.9%。大量临床实践证明，T-SPOT是诊断结核感染方面具有良好敏感性和特异性的方法，在鉴别活动性结核和潜伏结核感染，预测结核发病风险方面具有重要的意义，目前的检测技术其标本已不局限于痰、静脉血，在支气管肺泡灌洗液、胸腹水、脑脊液等也可用于肺结核及肺外结核的诊断，有的认为用其他体液标本检测的灵敏度还显著高于外周血标本，这样就为肺外结核病的诊断增加了一个快速确诊的方式。
T-SPOT逐渐成为在结核病诊断领域中具有***性的方法而受到推崇并成为首选检测方法。

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有学者研究指出：T-SPOT.TB阳性对结核病的诊断具有强大的支持作用,但存在一定的假阳性,而通过ADA阳性诊断结核病存在一定的假阴性,两者联合,能明显提高阳性率和特异性;但T-SPOT.TB检测阴性,基本可排除结核病(HIV病人除外),对结核病的排除具有十分重要的意义。临床值得注意的是T- SPOT的阴性结果对结核感染的排除率达到95%以上。造成假阴性可能有患者处于窗口期；严重免疫功能不全（HIV感染者）；特殊肺外结核；实验非正常操作等。