突发疫情病原微生物应急检测技术方案

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突发疫情病原微生物应急检测技术方案

1 总则

1.1 编制目的

规范病原微生物实验室应急检测，为实验室应对突发紧急疫情以及新发传染病、不明原因感染性疾病提供技术指南。

1.2 适用范围

新发传染病、不明原因疾病实验室检测；重大烈性传染病、感染性疾病（如SARS、禽流感、炭疽病、猪链球菌等）病原学诊断。

2 检测准备

2.1 检测方法的建立

2.1.1 按不同症候群分类，建立各种病原实验室检测方法尤其是快速检测方法，制定病原检测标准操作规程（SOP，包括操作步骤、方法来源、参考文献、生物安全条件等）。SOP对操作步骤的描述应详尽、准确，保证实验人员能据此正确完成实验。呼吸道感染、感染性腹泻、病毒性脑炎脑膜炎、出血及虫媒相关疾病等四个症候群各病原检测项目。

2.1.2 应用多功能血清学分析仪，检测各种病原感染后血清抗体。

2.1.3 应用悬浮芯片系统进行病原体高通量检测。

2.1.4 实验室对新发传染病及新出现的病原检测技术的进行跟踪，适时引进检测方法，同时对检测方法的特异性进行评估。

2.2 检测设备的使用

突发疫情相关的主要仪器设备由专人负责修订标准操作规程（SOP，包括操作步骤、设备维护、技术资料目录、维修及技术支持），每台仪器会***操作、熟练使用者不少于3人，保证应急检测时轮岗所需。

2.3 试剂器材的储备

实验室有专人负责突发疫情相关试剂器材储备，保证有足量的个人防护设备、采样器材、检测试剂耗材储备并及时补充，确认检测试剂在有效期内。

3 检验人员

参加突发疫情检测人员应全天24小时保持通讯畅通，接通知后半小时内赶到实验室。实验室合理安排人员休假，保证应急检测有足够的实验人员。外出集体活动时应留人员值守。

4 检测

4.1 任务下达与样品接收

应急检测任务由应急管理办公室或中心领导下达，必要时实验室人员参加现场采样。样品接收可按《疾病预防控制类样品检测工作程序》（JSJK/CX-36）规定实施简化程序，直接送检测实验室后补办交接手续。

4.2 检测方法选择

实验室应与现场充分沟通，获取样本相关信息。根据样品种类、发病时间、采样时间、采样部位等情况综合考虑，选择分子扩增、分离培养、抗原检测、抗体检测等方法，避免无意义项目检测。

4.2.1 确定优先检测的项目

4.2.2 按照疾病症候群确定病原体检测范围。

4.2.3 根据现场提出的病因假设优先安排检测项目。

4.2.4 根据特定疾病一般流行规律或本地局部流行规律判断，发病概率高的病原体优先检测。

4.2.5 无法提出病因假设时，优先采用高通量检测方法。

4.2.6 优先进行病原学快速检测和病原分离，病原学检测无阳性结果可通过血清学检测寻找病因线索。

4.3 生物安全防护

已知病原体或高度疑似病原体检测，按照生物安全管理体系进行危害评估，在相应等级生物安全实验室检测；不明原因感染性疾病标本检测，原则上在BSL-2级生物安全实验室进行。

4.4 检测结果评估

4.4.1 假阳性风险。应确认分子扩增试验严格按照4个分区进行，确认操作过程中阳性对照品未造成污染或不使用阳性对照。首次使用的PCR方法扩增产物应测序确认。血清学检测，除非试剂特异性非常肯定，原则上必须设正常对照组。

4.4.2 假阴性风险。任何试验方法都有检测限，应谨慎使用阴性检测结果排除诊断，除非业内公认可以作为排除诊断指标（如发病28天后血清检测SARS抗体阴性）。

4.4.3 一种以上病原体阳性结果。首先应评估所有阳性结果是否都是真阳性，如果是，评估是否具有同等的诊断价值。不应机械地用实验结果解释病因，谨慎作“多种病原体协同感染”之类的结论。

4.4.4 病因诊断。病因诊断应综合现场流行病学调查和实验室检测结果进行。尤其要注意不同采集部位样本的检测结果诊断价值不同。尽可能有不同方法实验结果的相互验证。

5 报告

5.1 采用快速诊断方法得出初步检测结果，经评估后可用电话等方式初步报告，供现场防制参考。结果确认后出具正式报告。

5.2 检测报告一般由经授权的科室负责人签发，加盖检验专用章；涉及重大疫情、甲类传染病及新发传染病首发病例的检测报告，由科室负责人审核，技术管理层或授权签字人签发。

5.3 实验室恪守为客户保密的承诺，对公众发布重大疫情实验检测结果不是实验室职责。