【即时求助】求急性再障图片\流式细胞术

大**)

本人为了完成毕业论文的设计及撰写，急求正常骨髓图片和再障的骨髓图片,请各位同仁有的话帮帮我,不胜感激.等候佳音.:'(

还有流式细胞仪结果的分析和计算方法,下面是我的课题结果之一,有谁帮我提供正确的计算反复发，或者给我好的建议.谢谢,大家帮我看看

[ 本帖最后由 大豆:) 于 2006-8-30 10:15 编辑 ]

福**莹

楼主想要统计什么啊？比例的差异吗？直接将所得的数据（百分比）进行统计不行吗？

大**)

原帖由 福娃莹莹 于 2006-8-30 13:33 发表
楼主想要统计什么啊？比例的差异吗？直接将所得的数据（百分比）进行统计不行吗？

要从所的图中计算出CD3\CD4CD8的数值在统计.请指教计算方法,我知道怎么统计的.谢谢

g****g

1 测定细胞存活率1.1取对数生长期的细胞,均以4×105/mL 密度接种于6孔细胞培养板上；1.2培养过夜后，用相应药物处理细胞；1.3 消化收集细胞,包括培养液中悬浮的死细胞；1.4 300g离心5 min，去上清；1.5 加1mL PBS缓冲液重悬细胞，再次离心去上清1.6 最后重悬细胞于含5 g/mL碘化丙啶(propidium iodide, PI)的PBS缓冲液中(PI buffer：3.4 mM 柠檬酸钠(Trisodium Citrate), 9.65 mM NaCl, PI 20 mg/mL, 0.03% Nonidet P-40 , 配于H2O中)；1.7 避光冰上孵育10 min,上流式细胞仪测定细胞存活率。 2 测定细胞周期2.1取对数生长期的细胞,均以4×105/mL 密度接种于6孔细胞培养板上；2.2培养过夜后，用相应药物处理细胞；2.3 消化收集细胞，包括培养液中悬浮的死细胞；2.2 收集的细胞经PBS缓冲液洗一次后，去上清，将细胞逐滴加入70%预冷的乙醇中，4℃避光固定30 min；2.3 加BSA，离心去上清，重悬细胞于PBS缓冲液，再次离心，去上清；2.4 重悬细胞于含100 unit/mL RNA酶的PBS缓冲液中，避光37℃处理30 min；2.5 加2 mg/mL PI至终浓度50 g/mL，避光孵育30 min，过滤后上流式细胞仪分析。 3 测定胞内ROS的积聚 3.1取对数生长期的细胞,均以4×105/mL 密度接种于6孔细胞培养板上；3.2培养过夜后，用相应药物处理细胞；3.3 消化收集细胞； 3.2 PBS缓冲液清洗一次，随后重悬细胞于1mL的PBS缓冲液中；3.3加荧光探针CM-H2 DCFDA至终浓度1 M/mL，37℃孵育30 min，上流式细胞仪分析活细胞内ROS的积聚情况。