一种快速、有效的骨髓增生性肿瘤CALR突变检测法

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骨髓增殖性肿瘤（MPN）最常见的基因突变是JAK2 V617F突变，2013年12月19日，奥地利科学院分子医学中心的Klampfl Thorsten博士在《新英格兰医学杂志》发表论文，发现了MPN新的分子学标志——CALR突变。CALR突变有望进一步提高对MPN的诊断水平，并且由于其特殊的临床意义，可能为MPN的个体化治疗及最终的靶向治疗研究提供重要依据。

近日，发表在《美国临床病理学杂志》（American Journal of Clinical Pathology，AJCP）的一项研究，来自德克萨斯大学安德森癌症中心的研究人员开发了一种基于聚合酶链反应（PCR）的方法，在临床实验室检测MPNs的CALR突变。

试验从67例JAK2野生型MPNs（22例与外周血匹配）的骨髓样本中提取DNA，其中54例为无法归类的骨髓增生异常综合征/MPN，16例为不典型的慢性粒细胞白血病。试验使用基因组DNA在CALR 的9号外显子检测体细胞突变，用荧光标记且M13标签的引物进行PCR，对产物进行毛细管电泳（CE），然后是Sanger测序。详细的分析了性能特征。

结果显示，在67例JAK2阴性的MPNs中发现19例（28.4%）CALR突变，包括14例I型（缺失52对碱基对[bp]）、4例II型（插入5 bp）、1例III型（缺失18 bp）。所有的突变经Sanger测序确认。敏感性研究表明，CE和Sanger测序具有高重复性，突变检测水平分别为2.5%和5%。

这种方法可以快速、方便的筛查MPNs中的CALR突变，从而减少了需要Sanger测序评估的病例数，减少了劳动力，改善了周转时间。
来源：生物360