浅谈怎样做好酶免试验室内质控

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浅谈怎样做好酶免试验室内质控
     定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能监测实验的有效性，无法监测灵敏性及测定下限的变化，为了更好的保证血液检测质量，必须使用弱阳性质控血清进行外部评价，即室内质控。它的主要作用在于监测实验的精确性和重复性，发现随机误差，减少系统误差对实验的影响，那麽采供血机构实验室如何做好酶免实验的室内质控就显得尤为重要，现就日常工作中的几点体会，与同行分享：

     选择合适的质控血清浓度
     
    现在采供血机构使用的室内质控血清基本上都是从卫计委临床检验中心购买的，而且卫计委临检中心针对一个实验项目提供的室内质控品又是一个系列浓度，那麽我们就必须对这一系列浓度的质控血清进行测定，以选择适合自身浓度的质控品。方法为：购买少量系列浓度的质控品，以目前正在使用的试剂、方法对其进行测定，求其OD均值，并计算出S/CO均值，以3倍左右的S/CO值作为选择质控血清浓度的标准，按《血站实验室质量管理规范》要求，采供血机构实验室最少使用2种以上试剂（国产或进口），也就是说每个检测项目我们应当根据试剂的不同选择不同浓度的质控品，虽然国产试剂之间差异不是很大，但国产试剂与进口试剂之间存在很大的差异，选择时应当特别注意。

     做好质控血清的保存和使用
     
     购买回质控血清后，应严格按照要求及时保存在-20℃以下，并做好标识，使用时应根据实验用量，有规律、有计划地对其融解，最好每周融解一次，保存在4℃冰箱内，避免反复冻融，也不要一次融解过多，长时间使用；另外，在实验过程中应当尽量减少质控血清在室温的放置时间，加样完毕后及时收回放进冰箱。只有这样才能保证质控血清内各成分相对稳定，从而使监测实验结果的精确性得到保证。

     做好新进质控品使用前的确认工作
     
     每新到一批质控品，由于邮寄过程中温度不能保证（3-4天），质控品浓度会有所变化，尤其是高温季节，因此，使用前质控品的确认就显得尤为关键，方法为：用同批号的试剂对其测定，求出S/CO均值，与原来使用相同浓度（不同批号）的质控品测定的S/CO均值比较，自己制定一个可接受范围标准，若在标准范围内则可使用，若超出标准，则不能使用。

     如何做好质控品的重复性和精确性
     
     现在，采供血机构实验室最头疼的是质控品的精确性和重复性，当然不同批号的试剂，不同批号的质控品，不同的人员操作，会对质控品的重复性产生一定的影响和差异，但在实验过程中发现这个差异不大，完全可以接受，其主要影响因素为：1全自动酶免系统前处理加样的准确性和酶标阅读仪测量的准确性，我们应当定期对其维护、保养和校准，确保加样和判读准确无误。2实验室必须有一个相当恒定的温度和湿度（温度18-25℃，湿度30-70％），尤其是在每年换季时，温差大，更应保证室内的温度和湿度。3工作人员要形成一个相当稳定的工作流程和良好的操作习惯，不能随意的更改实验流程，更不能非法操作。

     如何做好室内质控的连续性
     
    大家都知道，不同批号的试剂、质控品、不同的人员操作，都应重新绘制质控图，这样就很难保证质控图的连续性，尤其是一些小的中心血站，试剂和质控品的批号不停的更换，这样就更不能保证室内质控的连续性。另外，重新绘图时，会暂时出现一个质控图的断档现象，而且断档期的数据无法得到控制，形成一时的“盲区”。一个好的解决方法是：我们要加大同一批号的试剂和质控品的库存量，一般为（4-5个月），一方面保证短期不更换，另一方面是试剂和质控品同步；而在试剂或质控品更换时，只需在质控图上作明标记，按原来的方法继续绘图，达到一定次数后（一般为20次），重新求出均值和标准差，按新的数据继续绘图，这样就不会出现断档，也能更好地做到质控图的连续性。

     制定出适合自己工作实际的质控判断规则
     
     现在我们大多采用Levey-Jennings质控图法，如果按要求来讲，质控的判断规则最少也有七八条，甚至上十条，但从实际工作角度考虑，有些在工作中根本用不上，因此，我们必须调整和选择一些与实际工作密切相关的，以此作为标准，比如：一次超出±3SD,连续2次超出±2SD，连续两个点相差4SD，连续7次呈上升和下降趋势算作实验失控，总之要简练实用。

     以上是我们工作中关于如何做好室内质控的一些做法和体会，希望能和同行们交流，如有不妥之处，请多多指教