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原癌基因KRAS是EGFR信号通路中的重要分子之一,根据以往的研究表示,突变型KRAS基因始终处于激活状态,不受上游EGFR基因状态的影响,只有野生型(未突变型)KRAS基因受上游EGFR信号**的影响,这也是具有突变型KRAS基因患者对EGFR抑制剂(TKIs)治疗无效的理论基础。KRAS基因突变可以导致细胞逃逸凋亡,这种异常在肺癌中的发生率较高。
在国外,美国FDA(食品药品监督管理局)已经强制要求用药前进行EGFR、KRAS等基因检测。在国内,KRAS基因检测的开展得到中国抗癌协会的倡导。在此背景下,国内相继开展了KRAS基因的检测和相应治疗,KRAS基因检测已逐渐发展为恶性肿瘤常规检测项目。目前,有关KRAS突变的检测方法很多,大部分基因突变检测技术都是基于PCR进行的。
KRAS基因检测方法:常用方法为直接测序法和ARMS法,其中ARMS法是目前先进的方法,具有高特异性及高灵敏度的特点,其灵敏度较直接测序法高,可检测样品中1%—0.1%的突变基因,在欧洲已被广泛应用于临床检测。需要特别注意的是,规范的检测应在标准化的、有严格分区的实验室进行,避免污染造成的假阳性,且所有检测均应设立阳性对照和阴性对照。
KRAS基因检测送检样本类型:可为新鲜肿瘤组织(提供新鲜组织及RNA保存液)、新鲜肿瘤组织经快速液氮冷冻后冻存的组织或中性福尔马林固定石蜡包埋的组织。需要切一张切片经常规苏木素伊红(HE)染色确认肿瘤组织以及胸腹水。目前已有少部分检测机构开始运用抽外周血检测KRAS基因突变状态的高技术检测方法。
KRAS基因检测费用说明:由于KRAS基因突变检测尚未通过国家药监局的审批,各地物价局没有相应的收费标准(针对KRAS基因12,13,61三个位点的检测价格为2000-4000不等),因此目前患者都是自费进行检测,这限制了很多有需求的患者进行检测。不过,中国抗癌协会正在推广KRAS基因检测项目,其进入医保指日可待。
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肺癌KRAS突变检测.pdf
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