肿瘤干细胞与恶性纤维组织细胞瘤的治疗进展

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肿瘤干细胞

肿瘤干细胞学说的提出

1959年，Makino首次提出了肿瘤干细胞假说。1977年，Hamburger对来源于肺癌、卵巢癌和神经母细胞瘤的肿瘤细胞进行体外培养时发现只有极少数的肿瘤细胞能够形成克隆球，这部分极少数的细胞具有自我更新和多向分化的潜能，这一发现明确了“肿瘤干细胞理论”。现在人们把肿瘤干细胞学说丰满为:肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的一部分具有干细胞性质的细胞群体，具有自我更新能力和多向分化潜能，是肿瘤发生、发展、治疗后易复发和转移的根源。

肿瘤干细胞的特性(自我更新能力、多向分化的潜能、高致瘤性和强耐药性)

肿瘤干细胞的自我更新能力表现在强大的分裂能力上，主要是以不对称分裂为主，分裂得到的两个细胞，一个与上一代的细胞完全一样，一个则形成普通的肿瘤细胞。肿瘤干细胞和正常的干细胞有很多相似之处，具备自我更新、分化的能力，表达端粒酶、抗凋亡途径的激活、膜转运活性增加、具有侵袭及转移能力等。肿瘤干细胞的高致瘤性主要体现在体外实验，有研究报道，把500个肿瘤干细胞种植到裸鼠皮下就可以使裸鼠长出肿瘤。肿瘤干细胞的耐药性和耐药基因**G2有着紧密的联系。乳腺癌耐药蛋白(BCRP)属于三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(**G2)，其介导多药耐药的机制已成为目前的研究热点。**G2蛋白首次在MCF－7/Adr细胞中被检测到，有一个ATP结合位点和6个跨膜螺旋，可编码655个氨基酸，全长66kb，由15个内含子和16个外显子构成，外显子大小为60～332bp不等。

肿瘤干细胞的分离与纯化

肿瘤干细胞的存在得到证实后，人们迫切的想从中分离出这部分肿瘤干细胞，因为只有分离得到高浓度的肿瘤干细胞，才能进一步证明这部分细胞的干细胞特性。现在分离干细胞主要有三种方法:SP(sidepopulation)细胞方法、细胞表面特异性标志物方法和ALDH1(乙醛脱氢酶1)。

SP(sidepopulation)细胞方法

1996年，Gooadlle在用Hoechst33342荧光染色对小鼠骨髓造血干细胞进行检测时，通过紫外激发检测双波长分别为450nm的蓝色荧光和675nm的红色荧光，发现不到0.1%的细胞发出极弱的蓝光和红光，在流式二维分析点阵图上，这一小群细胞呈彗星状分布在细胞主群的一侧，他们将这群细胞称为SP(sidepopulation)细胞。

细胞表面特异性标记物

2003年Al－Hajj等从乳腺癌标本中分离出以CD24－CD44+Lin－为特异性表面标记物的乳腺癌干细胞(约占2%)，并且验证了这部分细胞的高致瘤性。之后又发现了CD133、CD90、CD44、CD34、CD38等一系列的特异性表面标记物。这些特异性表面标记物大都是在实体肿瘤中发现，在某些肿瘤中却没有实验可以证明。

ALDH1方法

乙醛脱氢酶1是乙醛脱氢酶家族之一，是催化细胞内乙醛氧化成乙酸的细胞溶质酶，参与多种组织的分化与基因表达。有研究表明:ALDH1在乳腺干细胞、造血干细胞(HSC)以及神经干细胞等细胞中高表达。这些结果表明ALDH1+是HSC分化的必需环境因素。现在对ALDH1高活性检测所应用最多的就是ALDEFLUOR试剂盒法。它所用到的是BAAA－ALDH的荧光底物，BAAA可以通过自由扩散进入到细胞膜，然后在细胞内被ALDH氧化成具有极性荧光的物质，通过流式分析仪就可以被检出。

恶性纤维组织细胞瘤(MFH)

MFH是由OBerien和Stout在1964年首先发现和描述的，当时称之为恶性纤维黄色瘤。1967年Stout和Latters首先将这一类肿瘤命名为MFH。病程发展缓慢，病变多为单发，偶可多发，并有家族性报道。

MFH的来源及组织学分型

关于MFH组织学起源的争论已经进行了近半个世纪，目前关于MFH组织学起源的讨论主要集中在组织细胞起源学说、成纤维细胞起源学说和原始间充质细胞起源学说。主要中心思想就是:MFH细胞起源于组织细胞，而且具有纤维细胞的结构和功能。随着科学技术的进步，电镜的发展，人们对MFH有了进一步的认识。Yamatea研究团队发现MFH和很多未分化的肿瘤有着相似的结构，并且发现MFH和其他软组织肿瘤有很多共同点，这一发现促使人们更加倾向于MFH是来源于未分化的软组织肿瘤的猜想。MFH主要分为五个亚型:席纹状－多形性、黏液性、巨细胞性、炎性、血管瘤样MFH。

MFH的临床表现和影像学表现

MFH的发病率位居各种软组织的首位。发病较晚，发病高峰期是50～70岁，仅血管瘤样型者可在20岁以前发病。下肢多发，尤其是大腿多见。而且发病位置较深，可侵犯肌层到骨，发展成骨恶性纤维组织细胞瘤(BMFH)，仅有10%发生在浅表部位。该肿瘤生长速度没有规律，可快可慢。患者一般是因为发现肿物就诊时被确诊。主要症状还包括厌食和体重下降。MFH的构成不同决定了其在影响学下的表现就有很大区别，在CT下可表现出低密度、等密度和高密度。报道显示，CT值可以在40～60Hu，也有的报道＜30Hu的个案。相比之下，MRI就显得有了更大的优越性，能较好地显示MFH的病变部位、范围、轮廓、肿瘤的组织成分以及与周围组织的关系。不同成分的组成时MRI也呈现不同的表现，T1WI呈低信号或等信号，T2WI以组织细胞为主的呈高信号，以纤维成分为主的呈等信号。

MFH的治疗的现状

虽然单纯切除或活检切除局部复发率高达80%～100%，但手术治疗仍是治疗MFH的主要方法，主要包括有边缘切除术、广泛切除术、根治切除术、截肢术。在临床上，化疗对于骨肉瘤和有尤文肉瘤都取得了良好的效果，但是在MFH的治疗上效果就差了很多，因为MFH患者多为老年人，限制了药物的安全使用剂量。很多术后的病人还是会选择多柔比星和异磷酰胺作为一种辅助性的治疗，或者两种药联合使用，但是随之而来的就是风险的增加。2007年有多篇文献报道，经过临床试验，吉西他滨(gem-citabine)和多西他赛(docetaxel)在难治和复发、转移性肉瘤(包括骨和软组织肉瘤)有效，并且有协同作用，是可以供选择的化疗方案之一。总的来说，MFH的治疗关键在于早期发现、及时治疗，要获得理想的效果则取决于治疗的正确性和彻底性。治疗以手术为主，配合术前、术后化疗及术后放疗等综合治疗。

肿瘤干细胞在MFH中的治疗。

MFH中肿瘤干细胞的研究现状

目前有很多研究已经在不同肿瘤细胞中成功分离出具有肿瘤干细胞特性的亚群，这些亚群具有很强的自我更新能力和耐药性，有一篇研究详细的报道了利用ALDH1来分离肿瘤干细胞，并且临床数据也显示了肿瘤干细胞的存在和肿瘤的治疗存在一定的联系。ALDH1高表达的肿瘤患者，5年存活率平均是19.8%(14.52～97.28)，ALDH1低表达的肿瘤患者五年存活率是58.7%(33.22～100)，统计学上P=0.0459＜0.05，差异具有统计学意义。ALDH1高表达的患者是ALDH1低表达患者死亡率的1.76倍，提示肿瘤干细胞的存在使得病人死亡率提高。

有研究利用CD133的方法也分离出具有干细胞特性的亚群，报道中CD133阳性亚群比CD133阴性亚群具有高分化和高耐药性。而且这些CD133阳性亚群高表达ALDH1。但不管用什么方法分离这些肿瘤干细胞，分选纯度一直是困扰我们的难题，首先是不同的肿瘤组织中干细胞的含量到底处在一个什么样的水平，不同的分选方法是有差异的，有人也尝试利用双标法来分选肿瘤干细胞，但是分选纯度很低，所以肿瘤干细胞的分选问题是干细胞理论提出后的一个难点问题。

MFH治疗的前景

目前对MFH还没有一种确切的根治方案，是否可以通过寻找MFH中的干细胞来治疗MFH，值得期待，因为肿瘤干细胞理论认为，肿瘤的反复转移和复发就是因为还无法清除赶紧肿瘤中的肿瘤干细胞，如果能找到直接杀死这部分细胞的特效药物，必定为肿瘤的治疗带来新的希望。很多文献也已经试图通过这种方法来实现消灭癌细胞，虽然暂时还没能找到一种药物特异性杀死肿瘤干细胞，现有的研究至少带来了一丝曙光。

来源：中国矫形外科杂志2015年5月第23卷第9期