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7月3日的“检验与临床”栏目刊登了《了解检验样本采集知识,为手足口病病原学诊断把关》一文。其后,数位读者来信,希望了解手足口病标本采集的注意事项、检查次数及对阳性结果的解读等相关知识。为此,本期报纸特别请赵秀英教授撰文进一步解答了以上问题。
标本采集注意事项
在手足口病标本的采集中,应注意以下事项。
·在手足口病的实验室诊断中,为保证检测结果的准确性和有效性,标本应在病例发病后尽早采集;对于血清学诊断,急性期血清应该在发病后尽早采集,恢复期血清在发病2周后采集。
·在运输和贮存过程中临床标本要避免反复冻融;肠道病毒或潜在含有肠道病毒的标本按B类包装,置于冷藏保存盒内运输,尽量缩短运输时间;可采用陆路或航空等多种运输方式,但在运输过程中应避免强烈震动、重力挤压等;在送到省、地、市级疾病预防控制中心(CDC)实验室时,包装盒内应带冰且包装完整;在上送标本的同时,须附带相关的《手足口病病例临床标本采样登记表》。
检查次数与患者病情
增加检测频率虽可提高病原学检出率,但会增加患者支出。故一般认为,连续两次检测可使逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的阳性率提高20%。几种标本联合检测也可提高阳性率,如咽拭子与疱疹液、咽拭子与肛拭子等联合。研究还表明,患者病情亦直接影响肠道病毒71型(EV71)与柯萨奇病毒A组16型(CA16)的核酸检出,重症病例检出率低于轻症病例,估计是免疫发病机制参与了重症病例的发病过程,从而使病毒得到早期清除。
对检查结果阳性的理解
如能从脑脊液、疱疹液中分离得到肠道病毒,则很可能该病毒就是病因病原。但病毒分离在临床应用较少,分子生物学方法(例如RT-PCR)是很实用的检测方法。
进行病毒核酸检测时,应选择质量较高的病毒 RNA 提取试剂盒,检测时要设立质控,并设定好RT-PCR 扩增反应和条件。
粪便检查肠道病毒虽敏感但最不特异。
而中枢神经系统、血液和泌尿道不是肠道病毒的易感部位,从这些部位采集到的标本检测到病毒或病毒核酸提示真正的侵袭性感染。
用免疫学检查判断EV71的近期感染或既往感染时,高效、快速且廉价,与CA16无交叉反应。免疫学诊断方法可作为手足口病病毒感染的间接证据,在重症患者的早期诊断方面,该方法的效果可能优于分子生物学方法。 |
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