关于同型半胱氨酸，你们是怎么做的！

c****0

因为这个项目一小时升高10%，
你们是怎么做的啊》
来一个做一个、、？

西****蝶

是的，我们这有对抽血处特别交待，碰到同型半胱氨酸要半小时内马上送检。

x****n

同型半胱氨酸最主要的两种检测方法是高效液相（HPLC）方法以及荧光偏振免疫检测（FPLA）方法。但已经有采用酶联免疫技术测定同型半胱氨酸的报道。

　　1  HPLC法  HPLC方法多采用柱前衍生化荧光检测技术。由于同型半胱氨酸在血液中以多种形式存在，所以标本的收集和处理就比较重要。所采集的抗凝血液应立即分离出血浆。Pastore等提出的衍生化方法较为简单，该法的衍生化过程全部在高效液相自动加样器内进行。首先将含有硼氢化钠、二甲基亚砜和氢氧化钠的溶液，含有EDTA和二巯基苏糖醇的溶液，以及1-辛醇，盐酸溶液共同加入标本中，室温下混匀1分钟后，加入含有衍生化试剂bromobimane的缓冲液，混匀1分钟后进样。色谱柱采用150mm×4.6mm的反相C18柱,进样前用pH3.6的硝酸铵和甲酸铵缓冲液平衡,然后用乙腈进行梯度洗脱.半胱氨酸和同型半胱氨酸的保留时间分别为3.76和4.14分钟。此方法灵敏度高，最低检测限可达50nmol/L,在其线性范围内相关系统γ>0.99; 批内不精密度为3.3%,批间不精密度为4.9%(n=10); 分离效果好,不仅能分析血液中的多种含硫氨基酸,还能对尿液标本进行测定。

　　但是，由于bromobimane衍生化的产物较多，会产生较多的杂峰。故目前也有不少研究人员使用特异性高的SBD-F作为衍生化试剂，但这种试剂以光不稳定，应避光操作，增加了操作的复杂性。不过，也有研究人员使用其它试剂进行柱后衍生化，紫外检测方法，但其操作较为复杂。

　　2  荧光偏振免疫检测（FPIA）法  FPIA法灵敏度高，检测速度快，但价格昂贵，故短时间期内不易普及。进行该检测时。首先也要用二巯基苏糖醇将结合型同型半胱氨酸还原出来，然后通过物异性的S腺苷同型半胱氨酸合成酶催化同型半胱氨酸转变为S腺苷同型半胱氨酸类似物，对特异性的单克隆抗体进行竞争性结合，引起示踪物偏光性的改变，从而检测出同型半胱氨酸的浓度。这种方法检测速度每小时可达20个标本。

　　3  酶转换免疫测定法  这种方法也需要将同型半胱氨酸先转化为S腺苷同型半胱氨酸，然后加入辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体，最后加入辣根过氧化物酶的底物，并在450nm处检测。加入蛋氨酸与半胱氨酸对检测结果均无影响，无交叉反应。这种方法的检测结果与高效液相的检测结果比较，相关系数为0.986;经过Bland-Altman Plot方法比较的差异值小于±2s。

x****n

影响同型半胱氨酸水平的因素

　　血浆中的同型半胱氨酸约70%与白蛋白结合，为结合型。其余的游离型则主要以二硫同型半胱氨酸和以二硫键结合的同型半胱氨酸-半胱氨酸化合物形式存在，只有少量以还原型同型半胱氨酸存在于血浆中。我们通常所指的是总的同型半胱氨酸浓度。

　　影响同型半胱氨酸水平最主要的因素莫过于遗传于食物营养缺乏。遗传因素主要包括N5甲基四氢叶酸转甲基酶及胱硫醚-β-合成酶的基因发生突变，引起酶的活性降低，从而导致高同型半胱氨酸血症。现在已经证明N5甲基四氢叶酸转甲基酶的缺陷，在体内叶酸缺乏的情况下，可以引起同型半胱氨酸浓度的明显升高。而根据Mudd等的研究，由遗传缺陷引起的胱硫醚-β-合成酶的活性降低，可导致血浆中同型半胱氨酸的浓度超过正常值的十倍左右。

　　对近1200名老人的研究表明，体内同型半胱氨酸的水平与饮食有着密切的关系，血浆中维生素B6、B12和叶酸的浓度越低，其同型半胱氨酸的浓度越高。由于动物蛋白中蛋氨酸的含量比植物蛋白约高三倍左右，可以产生较多的同型半胱氨酸，因此可对人体的动脉组织造成损伤。

　　其它因素包括性别、年龄、肾功能的损害、以及服用影响叶酸和B族维生素的药物，都可影响同型半胱氨酸的水平。尤其是肾功的损害，会严重影响那些含硫氨基酸的排出，因为肾小管内皮细胞的胱硫醚-β-合成酶对同型半胱氨酸的转化作用，被认为血液中的非蛋白结合型同型半胱氨酸很重要的代谢途径。

b****o

啊，学习了，原来跟样本保存时间还有关系。