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淀粉酶测定 (1)碘-淀粉比色法测定：B血清(或血浆)中a-淀粉酶(a-AMY)催化淀粉分子中α-1，4糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6糖苷支链的糊精。在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与空白管比较、从而推算出淀粉酶的活性单位。 (2)对-硝基苯麦芽七糖苷法：以对-硝基苯麦芽七糖苷为底物，经α-淀粉酶催化，水解为游离的寡糖(G5、G4、G3)及葡萄糖单位减少的对一硝基苯寡糖苷(4NP-G2、4NP-G3、4NP-G2);4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4，受α-葡萄糖苷酶催化，水解为对一硝基酚和葡萄糖。对一硝基酚的生成量，在一定范围内与R-淀粉酶活力成正比;但其摩尔数仅为酶解底物(4NP-G7)的三分之一，还有三分**结合在4NP-G4中。 PNP(对-硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。 (3)2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法 CNP(2-氯-4-硝基苯酚)的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。
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发表于 2016-1-5 14:15
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