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OPA法是由Roth等于1971年首先提出,用OPA加上琉基试剂,30s内与初级氨基酸在碱性条件下反应生成1-硫代一2一烷基异叫噪,可作高灵敏度的荧光检测,也可作紫外检测,其检测限可分别达到10-is和10-'2 mol水平.琉基试剂早期多采用2-琉基乙醇,但考虑到样品分离及实验安全,继而改进使用3-疏基丙酸代替.衍生时间一般控制在2 min之内,加人一定量的磷酸((pH 3. 0)缓冲液可以中止衍生化反应,采用梯度洗脱,可在15 min内分离18种氨基酸[Ell.本方法的点是衍生反应迅速,分辨率,灵敏度高,成本低,且过量衍生试剂不干扰分离;主要缺点是不能与二级氨基酸(如脯氨酸,经脯氨酸等)直接反应。
关于OPA法半自动和全自动都可以用。设置成终点法就可以。具体的你可以参照试剂盒说明书。比如说北化,长城等厂家的尿素测定试剂盒就有OPA法的。 |
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