做**的免疫荧光的问题

爱***时

请教各位园友，我朋友最近要做**的免疫荧光，以前没接触过组织液的做法，**和血液的做法是不是一样？**如何固定，也是用多聚甲醛么？如何固定真是让人头痛啊，是不是先涂片以后再放入固定液中？求具体指导。另外，他总结了一份荧光的实验步骤，请各位看看有无不妥。

(1)挑片，切片放入64-65℃烤箱中烤片50-60分钟。

（2）脱蜡：***I-***II-***Ⅲ各10分钟。

（3）100%无水酒精Ⅰ、100%无水酒精Ⅱ、95%、85%、75%酒精梯度水化，每次5min。

（4）PBS漂洗3次，每次5分钟。

（5）抗原修复（微波修复发），室温冷却30-50分钟。

（6）PBS漂洗3次，每次5分钟。

（7）5%山羊血清封闭30分钟，甩去多余液体。

（8）滴加一抗，放入湿盒中，4℃过夜。

（9）将湿盒放入37℃水浴箱中复温45分钟，PBS漂洗 3次，每次5分钟。（10）滴加荧光二抗，37℃水浴箱孵育1-1.5小时。

（11）PBS漂洗4次，每次5分钟。

（12）甘油封片，荧光显微镜下观察。（甘油=甘油：PBS 3：7）