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化验室常用药品的配制和标定方法.doc

一、        氢氧化钠标准溶液的配制和标定
C（NaOH）= 1mol/L
C（NaOH）= 0.5mol/L
C（NaOH）= 0.1mol/L
（一）氢氧化钠标准溶液的配制：
称取120g NaOH，溶于100mL水中，摇匀，倒入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管吸取下列规定体积的上层清液，注入1000mL无CO2的水中摇匀。
C（NaOH），mol/L                NaOH饱和溶液，mL
1        56
0.5                                 28
0.1                                 5.6
（二）氢氧化钠标准溶液的标定：
1.        测定方法：
称取下列规定量的、于105—110。C烘至质量恒定的基准邻二甲酸氢钾，称准至0.0001 g，溶于下列规定体积的无CO2的水中，加2滴酚酞指示液（10 g/L），用配制好的NaOH溶液滴定至溶液呈粉红色同时作空白试验。
C（NaOH）         基准邻苯二甲酸氢钾            无CO2水   
mol/L                      g                       mL        
1                        6                       80   
0.5                       3                      80
0.1                      0.6                      80
2.        计算：氢氧化钠标准溶液浓度按下式计算：
M
C（NaOH）=                     
               （V—V0）×0.2042
式中：C（NaOH）——氢氧化钠标准溶液之物质的浓度，mol/L；
V——消耗氢氧化钠的量，mL；
V0——空白试验消耗氢氧化钠的量，mL；
M——邻苯二甲酸氢钾的质量，g；
0.2042——邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量。K g/ mol。

二、        盐酸标准溶液的配制和标定
C（HCl）= 1mol/L
C（HCl）= 0.5mol/L
C（HCl）= 0.1mol/L
（一）        盐酸标准溶液的配制：
量取下列规定体积的盐酸，注入1000 mL水中，摇匀。
C（HCl）               HCl，mL
1        90
        0.5                     45
0.1        9

（二）        盐酸标准溶液的标定：

1.测定方法：
称取下列规定量的、于270—300。C灼烧至质量恒定的基准无水碳酸钠，称准至0.0001 g。溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示液，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，再煮沸2min，冷却后，继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白试验。
C（HCl），mol/L        基准无水碳酸钠，g            无CO2水，mL                                             
1                      1.6                         50   
0.5                     0.8                        50
0.1                     0.2                        50
3.        计算：
盐酸标准溶液的浓度按下式计算：
M
  C（HCl）=                       
              （V—V0）×0.05299
式中：C（HCl）——盐酸标准溶液之物质的量浓度，mol/L；
M——无水碳酸钠之质量，g
V——盐酸溶液之用量，mL
V0——空白试验盐酸溶液之用量，mL
0.05299——无水碳酸钠的摩尔质量，K g/ mol。
溴甲酚绿-甲基红混合指示剂：三份1g/L的溴甲酚绿乙醇溶液与一份2g/L的甲基红乙醇溶液混合。
三、        硫酸标准溶液的配制和标定
C（1/2H2SO4）=1 mol/L
C（1/2H2SO4）=0.5 mol/L
C（1/2H2SO4）=0.1 mol/L
（一）硫酸标准溶液的配制
量取下列规定体积的硫酸，缓缓注入1000 mL水中，冷却，摇匀。
1/2H2SO4，mol/L              H2SO4，mL
      1                         30
     0.5                         15
0.1         3
（二）硫酸标准溶液的标定
1.测定方法：
称取下列规定量的、于270—300。C灼烧至恒定的基准无水碳酸钠，称取至0.0001 g。溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示液，用配制好的硫酸溶液滴定溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。
C（1/2H2SO4），mol/L        基准无水碳酸钠，g           无CO2水，mL                                             
1                           1.6                      50   
0.5                          0.8                      50
0.1                          0.2                      50
2.计算：
硫酸标溶液浓度按下式计算：
                               M
C（1/2H2SO4）=                             
（V1—V0）×0.05299
式中：C（1/2H2SO4）——硫酸标准溶液之物质的量浓度，mol/L；
M——无水碳酸钠之质量，g；
V1——硫酸溶液之用量，mL；
V0——空白试验硫酸之用量，mL；
0.05299——无水碳酸钠的摩尔质量，mol/L
十五、乳及乳制品蛋白质的测定：
（一）原理：
蛋白质是含氮的有机化合物，食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氮与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏，使氨游离，用硼酸吸收后，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据消耗量乘以换算系数即为蛋白质的含量。
1.消化：加热时，有机质破坏，蛋白质分解。反应式如下：
       H2SO4          SO2 + H2O + [O]  
       2CH3 . CH . NH2 . COOH + 2[O]        2CH3.CHOH-NH2 + 2CO2
2CH3CHOH.NH2 + 10[O]       4CO2 + 2NH3 + 4H2O
2NH3 + H2SO4        （NH4）2SO4
（1）加入硫酸铜的作用：催化剂，加快反应速度。
2CuSO4         2Cu2SO4 + SO2 + O2
蛋白质分解的 C + O2           CO2   
蛋白质分解的 2H2 + O2          2H2O
Cu2SO4 + 2H2SO4         2 CuSO4 + SO2   + 2H2O
（2）加入硫酸钾的作用：提高反应温度（纯硫酸沸点330。C，添加硫酸钾后，可达400。C），加速反应速度。
K2SO4 + H2SO4          2KHSO4
2KHSO4          K2SO4 + SO2  + H2O   
但加入过多的K2SO4会造成沸点太高，生成的硫酸铵在513。C会分解。
2.蒸馏和吸收：
硫酸铵在碱性条件下，释放出氨，然后通过加热蒸馏，氨随水蒸汽出，蒸出的氨被硼酸吸收（硼酸为极弱的酸，在滴定中并不影响所用指示剂的变色反应）。反应式如下：
2（NH4）2SO4 + NaOH          2NH3   + Na2SO4 +H2O  
       2NH3  + 4H3BO3          （NH4）2SO4 + 5H2O
3.滴定：被硼酸吸收的氨，用硫酸或盐酸标准溶液滴定。反应式如下：
（NH4）2B4O7 + 2HCl +5H2O          2NH4Cl + 4H3BO3
（二）试剂与仪器：
1. 硫酸铜、  硫酸钾、  硫酸
2. 2%的硼酸吸收液：20g硼酸（分析纯）溶于1000mL热蒸馏水中，临用时加入10mL混合指示液。
3. 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。
4        .40%氢氧化钠溶液：40g 氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中。
2.        0.1 moL/L硫酸标准溶液或0.1 moL/L盐酸标准溶液。
（三）操作步骤：
1.样品的制备：固体样品1—2 g，液体样品10—20 g。把样品放入消化瓶中，同时加入6 g硫酸钾，0.2g硫酸铜，20 mL***。
2.消化：
先微火加热到100。C左右，以防瓶内泡沫冲出而影响结果，当瓶内发泡停止，稍加大火力，设定温度420—450。C。当内溶物的颜色逐渐转化成透明的淡绿色时，继续消化0.5—1h（若消化瓶内壁沾有碳粒时，进行摇动或待冷却后用30%的过氧化氢冲下，继续消化至透明的兰绿色为止）。然后从消化炉上取下冷却。
3.蒸馏和吸收：
1）将澄清的消化液小心移入100mL容量瓶中，以水冲洗三次消化瓶，洗涤液一起并入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水定容至刻度；
2）进液胶管分别插入蒸馏水瓶和40%氢氧化钠溶液中；
3）先开自来水进入冷凝管，待指示灯亮后，开蒸汽开关，蒸汽开关导出管放出蒸汽时，关闭汽阀。
4）在蒸汽导出管托架上，放上加有50mL硼酸吸收液的三角瓶，使蒸馏导出管的末端浸入接收液内。另一托架上放个内装10—20mL消化液的消化瓶。
5）吸碱适量至溶液颜色变黑后，开汽，蒸馏至氨汽全部蒸出（可用PH试纸测试）约200—250mL时关汽。
4        .滴定：
用盐酸或硫酸标准溶液滴定吸收液，终点颜色由兰绿色变为灰紫色。
计算：
               （V1—V0）×C ×0.0140×K
Pro含量% =                                   ×100
                      M×（V/100）
式中：V1——样品消耗酸体积，mL
V0——空白消耗酸的体积，mL
C——酸标准溶液的浓度，moL/L；
M——称取样品的质量，g；
V——从容量瓶中吸取消化液的体积，mL
0.0140——氮原子的摩尔质量，Kg/ moL
K——氮换算成粗蛋白的系数（纯谷类配方食品5.90，乳制品6.38，牛奶6.38，含乳婴儿谷物配方食品6.25）
（四）注意事项：
1）消化开始温度不宜过高，以防泡沫冲出。
2）消化时打开水阀，以利于废气导出。
3）消化完毕不得用冷水冷却，应自然冷却。
4）若需用H2O2水冲，必须在冷却后。
5）蒸馏时要打开水阀，作冷却水用。
6）吸收时必须伸入液面以下。