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标题: 外周血淋巴细胞参数LYMPH-Y在HIV感染者中的变化及应用价值探讨 [打印本页]

作者: ghlw1220dd 时间: 2014-4-1 20:03
标题: 外周血淋巴细胞参数LYMPH-Y在HIV感染者中的变化及应用价值探讨
淋巴细胞在机体免疫系统中起重要作用，机体未受到**时其大部分处于静止期和记忆状态。HIV感染机体后，侵犯血液系统的CD4+T淋巴细胞，造成其数量减少，并产生一系列抑制信号，进而使淋巴细胞失能、凋亡，抑制其细胞周期及自我更新。失能、凋亡的淋巴细胞及效应淋巴细胞抑制核酸及蛋白质的合成，从而使其核酸含量发生相应变化，因此淋巴细胞核酸含量与免疫功能有着必然的联系。Sysmex-2100血细胞分析仪WBC分类采用专用WBC分类检测通道：指加入特殊的WBC分类溶血剂和聚次甲基荧光染色液，采用半导体激光流式细胞检测，获得WBC分类散点图，纵坐标表示侧向荧光（SFL），反应每个细胞核酸含量；横坐标表示侧向散射光（SSC），反应每个细胞细胞内容物复杂程度，平均每个细胞的上述两项数值，由此得到中性粒细胞参数NEUT-Y、NEUT-X和淋巴细胞参数LYMPH-Y、LYMPH-X.本研究观察Sysmex-2100系列血球分析仪分类通道淋巴细胞LYMPH-Y参数在HIV感染患者中的变化，探讨其在HIV感染患者中的变化规律。
对象与方法
一、研究对象
收集2010年5月至2011年5月间经浙江省疾病预防控制中心（CDC）确诊，在门诊就诊（无合并症和机会性感染）的HIV感染患者108例为HIV感染组，CD4+T淋巴细胞<350/μL者进行高效抗反转录病毒治疗（HAART），其中男78例，女30例；年龄20——82岁，中位年龄37岁。另收集2010年6月至2011年5月间，隔半年检测CD4+T淋巴细胞的AIDS患者24例，其中男15例，女9例；年龄24——64岁，中位年龄35岁。活动期肺结核病组收集2009年10月至2011年4月间符合临床诊治标准患者80例，男52例，女28例；年龄18——78岁，中位年龄44岁。健康对照组来自温州医学院定理临床学院体格检查者（体温、血糖、肝功能、甲状腺功能及类风湿指标均正常，HBsAg阴性）100名，其中男68名，女32名；年龄19——74岁，中位年龄40岁。
二、仪器与试剂
日本Sysmex公司Sysmex-2100全自动血细胞分析仪及原装配套试剂，美国BD公司FACScalibur流式细胞分析仪及原装配套试剂，2台仪器定期用配套校准物校准且质控均为在控。
三、方法
1.标本的采集与检测：严格按照临床检验操作规程采集患者静脉血2mL,置乙二胺四乙酸（EDTA）-K2抗凝管混匀。按照Sysmex-2100全自动血液分析仪及BD流式细胞分析仪操作规程，2h内上机检测。每份标本检测完成后均收集淋巴细胞总数、淋巴细胞LYMPH-Y参数及HIV感染患者CD4+T淋巴细胞数量。
2.分组分析：根据CD4+T淋巴细胞计数将HIV感染组分为CD4+T淋巴细胞>350/μL组、（350——200）/μL组和<200/μL组，与淋巴细胞LYMPH-Y参数进行相关性分析。跟踪检测24例AIDS患者半年内CD4+T淋巴细胞计数和淋巴细胞LYMPH-Y参数，并分析两者变化趋势。
3.统计学方法：数据用SPSS16.0统计软件处理，对正态分布的数据以x±s表示，两组间均数比较用***样本t检验，多组间均数比较用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK检验。两组间数据相关性应用Pearson相关进行分析。P<0.05为差异有统计学意义。
结果
一、HIV感染组淋巴细胞的LYMPH-Y参数
HIV感染组淋巴细胞的LYMPH-Y参数低于活动期肺结核病组、健康对照组，差异有统计学意义（F=126.0,P<0.01），活动期肺结核病组外周血淋巴细胞绝对值低于HIV感染组、健康对照组，差异有统计学意义（F=13.3,P<0.01），见表1.
表1 HIV感染患者淋巴细胞LYMPH-Y参数与活动期肺结核病、健康对照组的比较（±s）
注：HIV为人类免疫缺陷病毒；TLC为淋巴细胞绝对值
二、不同CD4+T淋巴细胞对LYMPH-Y参数的影响
将HIV感染者依CD4+T淋巴细胞分层，同健康对照组比较，差异有统计学意义，淋巴细胞数量比较差异也有统计学意义。见表2.
表2 HIV感染患者CD4+T淋巴细胞数量对淋巴细胞LYMPH-Y参数的影响（±s）
注：HIV为人类免疫缺陷病毒；TLC为淋巴细胞绝对值
三、HIV感染组CD4+T淋巴细胞数与淋巴细胞LYMPH-Y参数相关性分析
HIV感染组CD4+T淋巴细胞数与淋巴细胞LYMPH-Y参数呈显著正相关（r=-0.621,P<0.01），见图1.将两组数据进行直线回归分析，其回归方程为y=0.110x+586.
四、AIDS患者淋巴细胞LYMPH-Y参数变化值（△LYMPH-Y）与CD4+T淋巴细胞变化值的相关性分析
图1 人类免疫缺陷病毒感染患者CD4+T淋巴细胞数与淋巴细胞LYMPH-Y参数的相关性
24例AIDS患者随访淋巴细胞LYMPH-Y参数变化值（△LYMPH-Y）与CD4+T淋巴细胞数的变化值（△CD4）呈显著正相关（r=0.883,P<0.01），见图2,将两组数据进行直线回归分析，其回归方程为△y=0.161△x+3.761.
图2 24例艾滋病患者ACD4+T淋巴细胞与△LYMPH-Y的相关性
五、淋巴细胞LYMPH-Y参数在指示HIV感染患者CD4+T淋巴细胞数≥200/μL的应用价值
将淋巴细胞绝对值、LYMPH-Y参数作敏感度和特异度分析，运用SPSS16.0软件中受试者工作特征（R（）C）曲线分析。曲线下面积分别为0.729、0.795,见图3,当LYMPH-Y的阈值取613.0时，指示CD4+T淋巴细胞≥200/μL的敏感度为70.4%,特异度为63.0%.淋巴细胞绝对值取2.015×109/L时，指示CD4+T淋巴细胞≥200/μL的敏感度为65.4%,特异度为66.7%.
图3 LYMPH-Y和淋巴细胞绝对值指示CD4+T淋巴细胞≥200/μL的受试者工作特征曲线分析
讨论
淋巴细胞在机体细胞免疫中起着重要的作用，CD4+T淋巴细胞起着调节和控制机体其他淋巴细胞的功能，当CD4+T淋巴细胞受激发，通过一系列的调控，能促使其他淋巴细胞增殖及功能活化，发挥正调控作用。同样当CD4+T淋巴细胞受损和功能受抑制时，其他淋巴细胞增殖和功能受抑制甚至凋亡。以上情况最终反应在淋巴细胞的核酸含量及一系列功能蛋白质上。而淋巴细胞参数LYMPH-Y反应淋巴细胞平均核酸含量。因此LYMPH-Y能在一定程度上反应淋巴细胞免疫功能。
本实验取细胞免疫受损的HIV感染患者、细胞免疫受激发的活动期肺结核病患者和健康对照进行比较，显示HIV感染组外周血淋巴细胞绝对值高于活动期肺结核病组和健康对照组。而HIV感染组淋巴细胞参数LYMPH-Y低于健康对照组和活动期肺结核病组，活动期肺结核病组淋巴细胞参数LYMPH-Y高于健康对照组；表明淋巴细胞绝对值不能很好地反应HIV感染组真实情况，且淋巴细胞绝对值的分布宽度（CV）明显偏高，这可能与HIV感染组构成有关。本研究HIV感染组患者均来自门诊，HIV早期患者所占比例较大，而HIV感染患者早期由于病毒感染**，使NK细胞和CD8+T淋巴细胞数量增加及CD4+T淋巴细胞轻度损害，因此对外周血淋巴细胞数量影响较少，甚至有轻度增加。HIV主要破坏CD4+T淋巴细胞并使其凋亡，在感染初期即抑制CD4-T淋巴细胞的免疫调节功能，并启动CD4+T淋巴细胞的凋亡程序，引起CD4+T淋巴细胞进行性减少。而淋巴细胞LYMPH-Y参数反应淋巴细胞平均核酸含量，则较好地反应这些变化。活动期肺结核患者其细胞免疫受激发且消耗增加，故淋巴细胞数量减少，而反应淋巴细胞平均核酸含量参数LYMPH-Y高于健康对照组和HIV感染组，能为临床上初步区别HIV感染与肺结核提供依据。因此，淋巴细胞参数LYMPH-Y能初步反应机体免疫状态。
CD4+T淋巴细胞是HIV的一个主要靶目标，在疾病早期即出现数量减少，流行病学和临床研究都表明，CD4+T淋巴细胞与疾病分期最为相关，并有助于判断患者机会感染的可能性，提示医师给予患者特异预防止疗的最佳时间。本研究根据患者CD4+T淋巴细胞数值分层，发现用淋巴细胞LYMPH-Y参数指示CD4+T淋巴细胞有一定诊断意义。为更进一步探讨淋巴细胞LYMPH-Y参数与CD4+T淋巴细胞关系，本研究进行的相关性分析提示，外周血淋巴细胞LYMPH-Y参数在一定程度上能反应CD4+T淋巴细胞情况。
AIDS是一种进展性疾病，当疾病进入发病期时患者情况往往会发生很大变化，目前以CD4+T淋巴细胞数量监测疾病进展情况。由于本次研究对象为门诊患者，受到患者流动性、主观意愿及死亡等因素影响，本研究只定期跟踪和分析了24例AIDS患者淋巴细胞LYMPH-Y参数变化值。（△LYMPH-Y）和CD4+T淋巴细胞数的变化值（△CD4+），显示两者间存在显著性相关，表明淋巴细胞参数LYMPH-Y变化同CD4+T淋巴细胞数的变化较一致，虽然跟踪分析例数偏少，存在一定欠缺，但分析淋巴细胞参数LYMPH-Y变化对HIV感染患者病情监测和判断有一定参考价值。
综上所述，在缺乏进行CD41+T淋巴细胞计数条件的情况下，外周血淋巴细胞参数LYMPH-Y有助于反应CD4+T淋巴细胞情况，并与疾病进展密切相关。测定淋巴细胞LYMPH-Y参数有助于评价HIV感染患者的免疫状况以及疾病的进程，可作为疾病进展的指标之一。

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