核素治疗的骨转移瘤患者免疫学指标的变化

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[摘要]  目的 研究放射性核素氯化89锶（89SrCl2）治疗骨转移瘤前后机体免疫功能的变化及治疗有效和无效患者免疫学指标的差异。方法 选择经临床确诊的应用放射性核素89SrCl2治疗的以骨转移瘤为首发病症，未经过任何治疗的患者25例及正常对照组20例。分别测定各患者治疗前、后及正常对照组T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值，并比较无效患者与有效患者各免疫学指标。结果 比较正常对照组和骨转移瘤患者以及骨转移瘤治疗前后的免疫学指标的不同，通过t值检验发现各免疫学指标均有显著差异（p<0.05）。正常对照组和骨转移瘤患者、治疗无效的患者与有效的患者之间各指标差异显著（P<0.05）。结论 骨转移瘤患者免疫功能抑制。89SrCl2治疗后，免疫功能得到恢复，无效患者免疫功能经治疗后恢复程度低于有效患者。
[关键词]  骨转移瘤；免疫功能；T细胞亚群；89SrCl2

The Relativities Between the Immunological Indexes and The therapeutical result of the Bone Metastases Patients Treated With 89SrCl2
[Abstract]  Objective  To investigate the influence of 89SrCl2(strontium-89 chloride) on the immunological functions in the patients with bone metastases , and study the relativities between the immunological indexes and prognosis of the patients . Methods  25 patients who were diagnosed by clinic were treated with 89SrCl2 . The CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、were detected before and after 89SrCl2 treatment , as well in 20 controls . The difference of immunological indexes between the survivals and deaths were also compared . Result  The indexes between the patients and controls 、before and after the therapy were different significantly(p<0.05) . The indexes of the deaths were differ to that of the survivals (p<0.05) . Conclusion  The immunological functions in the patients with bone metastases were inhibited obviously . Treating with 89SrCl2 can improve their functions to a certain extent . The recover level of the inefficacious patients was lower than that of the efficacious patients. .
[Keywords]  Bone metastases ; immunological functions ; T lymphocyte subsets ; 89SrCl2
恶性肿瘤中晚期常伴有肿瘤细胞的广泛远处转移，而骨骼又是肺癌、乳腺癌、

前列腺癌等一些恶性肿瘤易转移的主要系统。许多学者证明：恶性肿瘤患者的免疫功能受抑制，再加上转移瘤侵及骨骼，两者相互作用可以导致患者机体的免疫功能严重抑制，而有效的治疗手段则可以改善其机体免疫。目前国内外学者对于放疗、化疗等一些方法治疗恶性肿瘤患者后其免疫功能变化有较多的研究，但
对于核素内照射治疗骨转移瘤方面，机体免疫功能变化还少见报导。本研究采用放射性核素氯化89锶（strontium-89 chloride，89SrCl2）治疗骨转移瘤，观察治疗前后T细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平的变化，同时观察这些指标的变化与疗效之间的关系。
1．资料与方法
1.1 病例选择  2001年2月至2003年4月在哈医大一院核医学科接受一次放射性核素89SrCl2治疗的病例完整的，无原发肿瘤，以肿瘤骨转移为先发病症，未经过任何治疗的患者25例，男10例，女7例，年龄34—71岁，平均54.1岁，均经过临床确诊(分别经病理、CT、MRI、SPECT确诊)。排除肝肾功能受损及全身衰竭者，均经静脉缓慢推注放射性核素89SrCl2 148MBq（4 mCi）。对照组为20例健康人，男10例，女10例，年龄20—62岁，平均45.2岁。两组近期无调节免疫用药史。
1.2 标本采集  正常对照组健康人、每例患者注射前及注射后3个月清晨空腹采集全血4毫升，2毫升注入试管中，凝固后分离血清，－20℃保存，用于测定TNF-α、IL-2；2毫升注入抗凝瓶中摇匀，进行CD4+、CD8+、CD4+/CD8+测定。
1.3 追踪所有骨转移瘤患者，按照林祥通教授推荐的疼痛标准[1]打分，分数提高2分者定为有效，余者定为无效者。
1.4 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+测定：采用全血直接免疫荧光染色法, 所用单克隆抗体标记CD3+、CD4+、CD8+均购自美国Becton  Dickison（BD）公司。流式细胞仪为Becton  Dickison（BD）公司生产的FACS calibur并以BD公司的Simu ISET软件进行测定和分析。
1.5各数据均以Mean±SD（均数±标准差）表示，结果采用t检验。
2 结果
由于本研究采用89SrCl2作为治疗骨转移瘤的药物，其有效期可持续100天左右，所以我们选择治疗后3个月免疫学指标用作参考标准。
2.1骨转移瘤患者治疗前的各项免疫学指标与正常对照组相应指标以及骨转移瘤患者治疗前后各项免疫学指标利用t检验相比较发现，治疗前与正常对照组比较：t CD4+=2.841、t CD8+=2.854、t CD4+/CD8+=4.245；治疗前后比较：t CD4+=2.137、t CD8+=2.239、t CD4+/CD8+=3.305，均有显著差异（p<0.05）。如表1：
表1  骨转移瘤患者89SrCl2治疗前后免疫学指标与正常对照组的比较
        治疗前        治疗后        正常对照组
CD4+        31.12±8.12        36.21±8.71        38.83±8.95
CD8+        41.75±10.91        35.08±10.14        32.19±8.51
CD4+/CD8+        0.84±0.22        1.07±0.27        1.29±0.47

2.2 89SrCl2治疗后两年之内有7例患者无效，18例有效，将无效患者和有效患者治疗前后的免疫学指标进行比较，治疗前两组各免疫学指标间无明显差异，无效患者和有效患者治疗前比较：t CD4+=0.038、t CD8+=0.020、t CD4+/CD8+=0.286，（p>0.05）两者不具有统计学差异。而治疗后两组之间差异显著，无效患者和有效患者治疗后比较：t CD4+=2.414、t CD8+=2.498、t CD4+/CD8+=2.730，（P<0.05）。如表2所示：

表2  89SrCl2治疗前后无效患者与有效患者免疫学指标比较
        无效患者        有效患者
        89SrCl2治疗前        89SrCl2治疗后        89SrCl2治疗前        89SrCl2治疗后
CD4+        31.06±6.36        32.09±5.72        31.16±5.83        37.81±5.18
CD8+        41.70±6.64        39.99±5.38        41.77±8.22        33.17±6.38
CD4+/CD8+        0.81±0.24        0.82±0.22        0.85±0.34        1.17±0.31

3．讨论
3.1 机体的抗肿瘤免疫与肿瘤发生、发展及预后均有着十分紧密的关系[2]。从临床角度讲，几乎所有的治疗手段均影响机体的免疫功能，如化疗、放疗、核素内照射治疗等。而核素内照射治疗骨转移瘤时，由于病变部位、核素作用机理等原因，核素对于机体免疫功能影响更加明显。罗国平[3]等一些作者在研究89SrCl2治疗作用时，发现白细胞和血小板会随治疗过程变化而降低和反弹。但是从机体免疫因子角度来探讨89SrCl2治疗作用及其对免疫功能的影响方面的研究，国内外学者探讨的还不多。
3.2 体外放疗、化疗等治疗手段有效时，其免疫功能将得到明显恢复，如果治疗无效时，免疫功能则恢复较差[4、5]。这从本研究中也可以看到同样结论。本研究中所采用指标为CD4+、CD8+、CD4+/CD8+，均是与机体抗肿瘤免疫功能（即细胞免疫）最为相关的免疫指标。其中CD4+是辅助T细胞（Th细胞），具有辅助和诱导Tc细胞（T杀伤细胞）发挥抑制肿瘤和细胞毒作用，而CD8+除了Tc细胞外，还表达于抑制T细胞（Ts细胞），抑制T细胞发挥免疫功能。本研究通过与正常对照组比较发现，骨转移瘤患者CD4+ 、CD4+/CD8+下降，说明骨骼转移瘤患者机体免疫功能降低。而研究所见到的CD8+升高则可从下述几方面解释：1、由于骨转移瘤的存在**机体Tc细胞增加，但由于恶性肿瘤发生于正常细胞，其表面抗原类似于正常组织，肿瘤本身亦可分泌一些因子使恶性肿瘤逃避Tc细胞监控，使其受到Tc细胞攻击的可能性降低[6]，所以CD8+值高时，肿瘤生存状态不受抑制。2、CD8+细胞的持续增高可能有利于肿瘤细胞的生长、侵袭。3、肿瘤细胞本身份泌一些影响免疫系统的肿瘤因子，促进CD8+的表达所致[7]。这些原因相结合就可以看到本研究治疗前患者的CD4+ 、CD4+/CD8+降低、CD8+升高，治疗后患者的CD4+ 、CD4+/CD8+升高、CD8+降低的结果。
3.3 本研究25例患者中7例无效，但有效患者和无效患者治疗前的CD4+、CD4+/CD8+、均低于正常，CD8+均高于正常，两者之间没有显著差异。经过89SrCl2治疗后其免疫学指标间有明显差异。有效患者治疗后的CD4+、CD4+/CD8+均明显高于无效患者，而CD8+均明显低于无效患者，导致这种结果具体原因不清。但这表明89SrCl2治疗效果明确时，恶性肿瘤的生长受抑制程度大，机体免疫功能将会恢复至较高水平。
所以通过CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平监测，可以十分客观的评价骨骼转移瘤患者的治疗效果，为进一步选择治疗药物、治疗时机提供科学、良好的指标[8]。
总之，骨转移瘤患者经过89SrCl2治疗后机体免疫功能得到改善，可以得到以下几个结果：1、89SrCl2不单纯止痛，它可以通过杀伤肿瘤细胞，促进机体免疫功能恢复而发挥治疗作用。2、免疫学指标可以客观评价89SrCl2治疗效果。3、进一步我们还可以根据免疫学指标的变化，初步筛选治疗药物及治疗时机。

参考文献
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4 王继营，高珊，崔黎，等．晚期肿瘤放疗前后免疫功能改变的初步观察．肿瘤研究与临床，2000，12：313-314．
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