加替沙星等多种抗生素对常见病原菌的抗菌活性

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加替沙星（海超®）为新一代氟喹诺酮类，它对引起呼吸道感染的革兰阳性菌（包括肺炎链球菌、β溶血链球菌、金葡菌）、革兰阴性菌、厌氧菌、非典型病原菌都有广泛的抗菌活性；对β内酰胺类和大环内酯类耐药的革兰阳性菌也有效；同时它对院内常见的病原菌也有活性。本研究目的是确定此药对于社区呼吸道感染及院内感染常见病原菌的抗菌活性。

    材料和方法

     测试菌株：２００３年９月至２００３年１２月?从北京协和医院门诊及院内分离出了３０７株菌，包括肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、β溶血链球菌、对苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌（ＭＳＳＡ）、肠球菌属、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌?包括产超广谱β内酰胺酶（ＥＳＢＬ）及不产ＥＳＢＬ的菌株?、绿脓杆菌。同一患者只取第一次的分离株。３０７株菌来自多种不同的标本类型，包括血液、胸水、痰、肺泡灌洗液、中耳液培养、窦内抽吸物、咽拭子、眼拭子等。

     材料与试剂：Ｘ、Ｖ和Ｘ＋Ｖ因子纸片、ＤＮＡ酶培养基、Ｏｐｔｏｃｈｉｎ纸片、乳胶凝集试剂、头孢硝噻酚纸片。本研究测试的抗生素包括青霉素Ｇ、头孢曲松、头孢呋辛、苯唑西林、氨苄西林、阿奇霉素、左氧氟沙星、加替沙星（海超®，扬子江药业集团上海海尼药业有限公司提供）、莫西沙星、环丙沙星。

     ＭＳＳＡ的药敏采用Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎ 琼脂。肺炎链球菌、Ａ群β－溶血链球菌的药敏使用加 ５％羊血的Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎ 琼脂。流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌的药敏采用流感嗜血杆菌专用培养基?ＨＴＭ?。

     方法：采用琼脂稀释法测定加替沙星等９种抗生素的最低抑菌浓度（ＭＩＣ）。琼脂稀释的操作严格按照美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）公布的标准进行。将ＭＳＳＡ的药敏平皿放在３５℃空气环境中孵育１６～２０小时，苛养菌在５％ＣＯ２ 环境中孵育２０～２４小时（但当测定阿奇霉素ＭＩＣ时，平皿在３５℃空气环境中孵育）。采用头孢硝噻酚法测定流感嗜血杆菌及卡他莫拉菌的β内酰胺酶的发生率。质控：用标准菌株金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ２９２１３、肺炎链球菌ＡＴＣＣ４９６１９、流感嗜血杆菌ＡＴＣＣ４９２４７、流感嗜血杆菌ＡＴＣＣ４９７６６来评价整个试验的准确性。质控跟随每批试验。耐药（Ｒ）、中介（Ｉ）、敏感?Ｓ?的判定采用ＮＣＣＬＳ ２００３年颁布的标准Ｍ１００－Ｓ１３（Ｍ７）进行。肺炎链球菌按照青霉素的敏感性分为三类：青霉素敏感株（ＰＳＳＰ，ＭＩＣ≤０．０６ μｇ／ｍｌ），青霉素中介株（ＰＩＳＰ，ＭＩＣ为０．１２～１　μｇ／ｍｌ），青霉素耐药株（ＰＲＳＰ，ＭＩＣ≥ ２ μｇ／ｍｌ），青霉素不敏感的肺炎链球菌（ＰＮＳＳＰ）包括ＰＩＳＰ和ＰＲＳＰ。

    结 果

     肺炎链球菌、β溶血链球菌

     ＰＳＳＰ对青霉素、头孢菌素、氟喹诺酮类均很敏感。随着青霉素耐药性的增加，头孢呋辛的耐药率逐渐增加，ＰＩＳＰ组为６．５％，ＰＲＳＰ组为９１．７％；ＰＩＳＰ组、ＰＲＳＰ组对头孢曲松都敏感，但头孢曲松的ＭＩＣ50、ＭＩＣ范围，ＰＲＳＰ组高于ＰＩＳＰ组。阿奇霉素对肺炎链球菌的活性很低，即使对于ＰＳＳＰ组，ＭＩＣ50、ＭＩＣ90均为２５６ μｇ／ｍｌ，耐药率高达９６％。６８株菌中，阿奇霉素对８９．５％的菌株ＭＩＣ≥１２８ μｇ／ｍｌ。

     ４种氟喹诺酮类中环丙沙星的活性最低，其不敏感菌株均比另外３种氟喹诺酮类高；莫西沙星对肺炎链球菌的活性最高（ＭＩＣ90＝０．２５ μｇ／ｍｌ），其次是加替沙星（ＭＩＣ90＝０．５ μｇ／ｍｌ），左氧氟沙星对肺炎链球菌的活性是加替沙星的１／４。

     图１显示加替沙星的活性不受青霉素耐药性的影响，其在三组的ＭＩＣ均呈良好的正态分布，峰值均为０．２５ μｇ／ｍｌ，只有２株ＰＩＳＰ，加替沙星的ＭＩＣ为４ μｇ／ｍｌ，而这２株菌莫西沙星的ＭＩＣ为０．５ μｇ／ｍｌ。

     １６株Ａ群β溶血链球菌对阿奇霉素的耐药率高达８１．２％，而对青霉素、二、三代头孢菌素、４种氟喹诺酮类很敏感。４种氟喹诺酮类中莫西沙星、加替沙星的活性略高于环丙沙星和左氧氟沙星，４药的平均ＭＩＣ分别为０．１８ μｇ／ｍｌ、０．２４ μｇ／ｍｌ、０．４４ μｇ／ｍｌ和０．６８ μｇ／ｍｌ。

     １０株Ｂ群β溶血链球菌对青霉素、二、三代头孢菌素均很敏感，但对阿奇霉素的耐药率达５０％。环丙沙星、左氧氟沙星对１０株Ｂ群β溶血链球菌的活性相似，ＭＩＣ50及ＭＩＣ90分别为１ μｇ／ｍｌ及６４ μｇ／ｍｌ，这两药的活性是莫西沙星、加替沙星的１／８～１／４（后两药的ＭＩＣ50、ＭＩＣ90分别为０．２５μｇ／ｍｌ和８ μｇ／ｍｌ）。

     流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌

     ３１株流感嗜血杆菌中，４株产生β内酰胺酶?β内酰胺酶发生率为１２．９％。这与测定的氨苄西林的不敏感率（１３．０％）相符。头孢呋辛、头孢曲松、阿奇霉素及４种氟喹诺酮类对其均很敏感，敏感率在９６．８％～１００％之间。４种氟喹诺酮类对流感嗜血杆菌的抗菌活性均很高，其中以环丙沙星的活性最高，ＭＩＣ值最低（ＭＩＣ90为０．０１６ μｇ／ｍｌ，ＭＩＣ范围为０．００８～０．５ μｇ／ｍｌ），其次是加替沙星与莫西沙星（ＭＩＣ范围为０．００８～１ μｇ／ｍｌ），再次为左氧氟沙星（ＭＩＣ为０．０１６～１ μｇ／ｍｌ）。

     ３３株卡他莫拉菌中，２４株菌（７２．７％）产生β内酰胺酶，这些产酶株不能使用不耐酶的青霉素类药物。头孢呋辛、头孢曲松、阿奇霉素、４种氟喹诺酮类对卡他莫拉菌的抗菌活性很高，ＭＩＣ值均较低。图２显示４种氟喹诺酮类的ＭＩＣ均呈正态分布，最高ＭＩＣ为０．５ μｇ／ｍｌ。环丙沙星、加替沙星的ＭＩＣ峰值为０．０３２ μｇ／ｍｌ?左氧氟沙星峰值为０．０６ μｇ／ｍｌ，而莫西沙星为０．１２ μｇ／ｍｌ。

     ＭＳＳＡ和肠球菌属

     ３０株ＭＳＳＡ对于头孢呋辛、头孢曲松均敏感，对阿奇霉素的耐药率最高，达４６．７％，对４种氟喹诺酮类耐药率低。４种氟喹诺酮类比较，莫西沙星活性（ＭＩＣ平均为０．０８ μｇ／ｍｌ）略高于加替沙星?ＭＩＣ平均为０．１０７ μｇ／ｍｌ??两者的活性约为左氧氟沙星（平均ＭＩＣ为０．３３ μｇ／ｍｌ）的２倍，是环丙沙星的（ＭＩＣ平均为０．５５ μｇ／ｍｌ）４倍。环丙沙星及左氧氟沙星对１株ＭＳＳＡ的ＭＩＣ为８ μｇ／ｍｌ，但这株耐药菌对加替沙星、莫西沙星敏感（ＭＩＣ为２ μｇ／ｍｌ）。对于肠球菌，氨苄西林的活性是测定药物中最好的，耐药率最低（３５％）；而４种氟喹诺酮类均不佳，但加替沙星、莫西沙星的抗菌活性略高于环丙沙星、左氧氟沙星，前二药的ＭＩＣ90、ＭＩＣ略低于后二者。

     大肠杆菌、肺炎克雷伯菌

     由于阿奇霉素本身对肠杆菌科细菌无活性，因此不与其他抗生素进行比较。头孢呋辛对ＥＳＢＬ（＋）的大肠杆菌无活性，仅６．７％～１３．３％的ＥＳＢＬ（＋）大肠杆菌对头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星敏感。ＥＳＢＬ（－）大肠杆菌对头孢呋辛、头孢曲松、４种氟喹诺酮类的敏感性分别为５３．３％、７３．４％和４０％。

     头孢呋辛、头孢曲松对ＥＳＢＬ（＋）的肺炎克雷伯菌无活性，但它们对于ＥＳＢＬ（－）株活性较高，耐药率分别为３３．３％和９．５％。肺炎克雷伯菌对４种氟喹诺酮类中的加替沙星的耐药率最低。加替沙星与环丙沙星的活性相似，略高于左氧氟沙星和莫西沙星，４药的平均ＭＩＣ分别为１．２ μｇ／ｍｌ、１．５ μｇ／ｍｌ、２．０ μｇ／ｍｌ 和２．５９ μｇ／ｍｌ。

     绿脓杆菌

     头孢呋辛、头孢曲松和阿奇霉素对本研究测定的绿脓杆菌均无抗菌活性。对于绿脓杆菌，环丙沙星活性最高，其次为加替沙星、左氧氟沙星，再次为莫西沙星。

    结 论

     ●对于肺炎链球菌，氟喹诺酮类有好的抗菌活性，敏感率为９３．５％～１００％。莫西沙星的抗菌活性是加替沙星的２～４倍，加替沙星是左氧氟沙星活性的４倍，是环丙沙星的８倍。莫西沙星、加替沙星的抗菌活性不受青霉素、大环内酯类耐药性的影响。

     ●肺炎链球菌对阿奇霉素耐药率高达９２．５％，并且８９．５％的菌株对阿奇霉素高水平耐药（阿奇霉素的ＭＩＣ≥１２８ μｇ／ｍｌ ）。

    　　　　●所有β溶血链球菌对青霉素、头孢呋辛、头孢曲松敏感。４种氟喹诺酮对其抗菌活性大小依次为：加替沙星＝莫西沙星＞左氧氟沙星＝环丙沙星。６９．２％的β溶血链球菌对阿奇霉素耐药，其中３８．４％的菌株为高水平耐药?即ＭＩＣ≥１２８ μｇ／ｍｌ?。

     ●ＭＳＳＡ对头孢菌素、加替沙星、莫西沙星１００％敏感，仅５０％的ＭＳＳＡ对阿奇霉素敏感。莫西沙星活性略高于加替沙星，它们的活性是左氧氟沙星的２倍，是环丙沙星的４倍。４种氟喹诺酮类对肠球菌的活性均很低，加替沙星＝莫西沙星＞左氧氟沙星＝环丙沙星。

     ●流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌的耐药产酶率分别为１２．９％和７２．７％。二、三代头孢菌素、阿奇霉素、４种氟喹诺酮类对这两种菌的抗菌活性均很高。对于流感嗜血杆菌，环丙沙星的活性略高于加替沙星、莫西沙星、左氧氟沙星；对于卡他莫拉菌，环丙沙星＝加替沙星，略高于左氧氟沙星和莫西沙星。

     ●头孢呋辛、头孢曲松对ＥＳＢＬ（＋）的大肠杆菌、肺炎克雷伯菌无活性。大肠杆菌对４种氟喹诺酮类的敏感性＜３０％?肺炎克雷伯菌对４种氟喹诺酮类的敏感性为５０％。加替沙星与环丙沙星对肺炎克雷伯菌的活性相似，略高于左氧氟沙星和莫西沙星。

     ●对于绿脓杆菌，加替沙星、左氧氟沙星的抗菌活性是环丙沙星活性为１／４，而莫西沙星则为１／８。

     ●研究显示，加替沙星（海超®）对于社区感染及院内感染常见病原菌的体外抗菌活性较强，值得临床推广并继续研究。

闲**鹤

呵呵，我们医院已经开始应用加替沙星了，效果还不错